1994 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
06277206
|
Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
花園 豊 東京大学, 医学部(病), 助手 (70251246)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 光 東京大学, 医学部(病), 特別研究員
小川 誠司 東京大学, 医学部(病), 医員
田中 智之 東京大学, 医学部(病), 助手 (50227154)
三谷 絹子 東京大学, 医学部(病), 助手 (50251244)
|
Keywords | GM-CSF / エリスロポエチン / インターロイキン(IL)-3 / Grb2 / Ash / Vav / チロシンキナーゼ / チロシンリン酸化 / 細胞内情報伝達機構 |
Research Abstract |
我々は、造血因子依存性ヒト白血病細胞株(UT-7等)を用いて、顆粒球前駆細胞に作用する顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)や赤芽球前駆細胞に作用するエリスロポエチン(EPO)のシグナル伝達の研究を続けてきた。本年度の成果は以下の通りである。 (1)Grb2/Ash共沈蛋白質pp94の解析-GM-CSF、IL-3、EPO依存性のヒト白血病細胞株UT-7をGM-CSF、IL-3、EPOで刺激すると、Grb2/Ashと複数のチロシンリン酸化蛋白質が共沈する。これらの共沈蛋白質のうち最も強くリン酸化される94kDのチロシンリン酸化蛋白質(pp94)の性状解析を進めた。pp94のチロシンリン酸化は造血細胞の造血因子と関係し、また、GST融合蛋白質を用いたin vitroの沈降実験から、pp94はGrb2/AshのSH2と結合することがわかった。 (2)Vavの役割-造血細胞において実際にRasを活性化するguanine nucleotide exchange factor(GEF)として、我々はプロトオンコジーンであるVavに注目した。Vavは、最近になって、Rasを活性化するGEFであると報告された。UT-7からVavを免疫沈降してチロシンリン酸化レベルを調べると、VavはGM-CSF、IL-3、EPOの刺激でチロシンリン酸化される。さらに、GST融合蛋白質を用いたin vitroの沈降実験から、UT-7においてVavがGrb-2/AshのSH3と結合することを明らかにした。造血細胞におけるRasの活性化経路の一つとして、チロシンキナーゼ→Grb2/Ash→Vav→Rasの可能性があり興味深い。
|
-
[Publications] Hanazono,Y.et al.: "Tyrosine phosphoiylation of the proto-oncogene product Vav and its association with the adapter Grb2/Ash in a human len Kania cell line UT-7." Jpn. J.Cancer Res.(in press).
-
[Publications] Tanaka,T.et al.: "An acute myeloid leukemia gene,AML1,regulates hemopoietic myeloid cell differentiation and transcriptional activation antagonistically by two alter rafive・・・・" EMBO J.14. 341-350 (1995)
-
[Publications] Ogawa,S.et al.: "Homozygous loss of the cyclin-dependent kinase 4-inhibitor(p16)gene in human leukemias." Blood. 84. 2431-2435 (1994)
-
[Publications] Tanaka,T.et al.: "Evi-1 raises AP-1 activity and stimulates c-fos promoter transactivation with dependence on the second zinc finger domain." J.Biol.Chem.269. 24020-24026 (1994)
-
[Publications] Ogawa,S.et al.: "The C-terminal SH3 domain of the mouse c-Crk protein negatively regulates tyrosine phosphorylation of Crk-associated p130 in rat 3YI cells." Oncogene. 9. 1669-1678 (1994)
-
[Publications] Mitani,K.et al.: "Generation of the AML1/Evi-1 fusion gene in the t(3;21)(q26;q22)causes blastic crisis in chronic myelocytic lenkemia." EMBO J.13. 504-510 (1994)