1998 Fiscal Year Annual Research Report
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06280218
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
片岡 徹 神戸大学, 医学部, 教授 (40144472)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
片岡 有里子 神戸大学, 医学部, 助手 (50233739)
苅谷 研一 神戸大学, 医学部, 助教授 (40263371)
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| Keywords | ras癌遺伝子 / GTP結合蛋白質 / raf癌遺伝子 / ホスホリパーゼC / raplA癌抑制遺伝子 / 翻訳後修飾 / アデニル酸シクラーゼ / シクラーゼ結合蛋白質 |
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| Research Abstract |
1, Rasとがん抑制遺伝子産物Rap1A(Krev-1)によるRaf-1, B-Rafの異なった活性調節の分子機構の解明、および、Rap1AのプロテインキナーゼAによる燐酸化のRaf-1活性抑制作用に及ぼす影響の解析から、「我々が発見したRasアクチベータ領域とRafシステインリッチ領域間のRas翻訳後修飾依存性の第二の結合の強度が適当であることがRafの活性化に必要」との仮説を証明した。
2, 出芽酵母アデニル酸シクラーゼについても、その結合蛋白質CAPのN末端36アミノ酸残基の領域とシクラーゼC末端領域の複合体がファルネシル化されたRasの第二の結合部位である事を遺伝学的、生化学的に証明し、結合認識の分子機構を予測した。エフフェクター活性化に於てRasの翻訳後修飾(ファルネシル化)が必須である分子機構が解明された。第二の結合の存在がエフェクターによらず普遍的であることが示唆された。
3, 線虫C.elegansにおいて新規Rasエフェクター候補蛋白質PLC210を発見し、それがRas/Rap1A蛋白質とGTP依存性に結合する新種のホスホイノシチド特異的ホスホリパーゼCである事を証明した。PLC210の哺乳動物におけるホモログを発見してcDNAをクローニングし、そのコードする蛋白質が線虫PLC210と同じ活性を示すことを証明した。PLC210の染色体遺伝子を破壊した線虫変異体のホモ接合体を得て、受精卵の細胞質分裂異常に起因する不妊(sterile)の表現型を観察した。
4, 線虫において、Ras/Rap1Aに対してGTP依存性に結合する領域とGDP-GTP交換促進活性を持つ領域との両者を有する新規出芽酵母Cdc25ホモログ蛋白質を発見し、更にそのヒトホモログのcDNAをクローニングした。Rasに対してエフェクターとしてと活性制御因子としての両方の働きを有する可能性がある。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Ohnishi,M.,et al.: "Selective inhibition of Ras interaction with its particular effector by synthetic peptides corresponding to the Ras effector region." J.Biol.Chem.273巻17号. 10210-10215 (1998)
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[Publications] Kim,J.H.,et al.: "Activation of Ras and its downstream extracellular signal-regulated protein kinases by the CDC25 homology domain of mouse Son-of-sevenless 1(mSosl)." Oncogene. 16巻20号. 2597-2607 (1998)
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[Publications] Nishida,Y.,et al.: "Coiled-coil interaction of N-terminal 36 residues of cyclase-associated protein with adenylyl cyclase in sufficient for its function in Saccharomyces cerevisiae Ras pathway." J.Biol.Chem.273巻43号. 28019-28024 (1998)
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[Publications] Watari,Y.,et al.: "Identification of Ce-AF-6,a novel Caenorhabditis elegans protein, as a putative Ras effector." Gene. 224巻1-2号. 53-58 (1998)
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[Publications] Hu,C-D.,et al.: "Effect of phosphorylation on activities of RaplA to interact with Raf-1 and to suppress Ras-dependent Raf-1 activation." J.Biol.Chem.274巻1号. 48-51 (1999)
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[Publications] Goshima,M.,et al.: "Characterization of a novel Ras-binding protein Ce-FLI-1 comprising leucine-rich repeats and gelsolin-like domains." Biochem.Biophys.Res.Comm.未定(in press). (1999)
