1994 Fiscal Year Annual Research Report

c-Metプロトオンコジーンファミリーのリガンドの解明

Research Project

Project/Area Number	06280223
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	水野健作九州大学, 理学部, 助教授 (70128396)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	原野友之九州大学, 理学部, 助手 (80037275)
Keywords	増殖因子レセプター / プロトオンコジーン / レセプター型チロシンキナーゼ / 肝細胞増殖因子
Research Abstract	c-Metプロトオンコジーン産物は肝細胞増殖因子(HGF)のレセプターである。本研究では、c-Metに類似した構造をもつレセプターファミリーをクローニングし、そのリガンドを明らかにすることによって、HGFファミリーの構造と機能を解明することを目的に研究を行った。トリ赤芽球症ウイルスのもつオンコジーンv-seaはc-Metと相同性の高いチロシンキナーゼ構造をもつことから、その細胞性ホモログc-seaのクローニングをまず行った。さらに、c-sea遺伝子をプローブとして、ヒトヘパトーマHepG2 c-DNAライブラリーをlow-stringencyの条件下でスクリーニングした結果、2種の新規なプロテインキナーゼSkyとLIMKをコードするcDNAをクローニングした。Skyは脳に高発現するレセプター型チロシキナーゼで、細胞接着因子様の細胞外ドメインをもつことを明らかにした。また、in situ hybridizationによりsky mRNAの発現を明らかにするとともに、Sky特異抗体を用いて、Skyの自己リン酸化活性とSrcファミリーとの会合についても明らかにした。 Skyの細胞外ドメインとヒトイムノグロブリンFcドメインとの融合蛋白質を発現させ、これを用いて、Skyリガンドの発現クローニング及びアフィニティークロマトグラフィーによる精製を現在進めている。一方、LIMKは2個のLIMモチーフをN末端部にもつ新しいクラスの細胞内セリン/スレオニンキナーゼと考えられ、その細胞内での機能についても検討中である。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] K.Mizuno,et al.: "Hairpin loop and second kringle domain are essenitial sites for heparin-binding and biological activity of hepatocyte growth factor." J.Biol.Chem.269. 1131-1136 (1994)
[Publications] K.Ohashi,et al.: "Cloning of the cDNA for a novel receptor tyrosine kinase,Sky,predominantly expressed in brain." Oncogene. 9. 699-705 (1994)
[Publications] K.Mizuno,et al.: "Identification of a human cDNA encoding a novel protein kinase with two repeats of the LIM/double zinc finger motif." Oncogene. 9. 1605-1612 (1994)
[Publications] K.Ohashi,et al.: "Molecular cloning of a chicken lung cDNA encoding a nocvel protein kinase with N-terminal two LIM/double zinc finger motif." J.Biochem.116. 636-642 (1994)
[Publications] T.Harano,et al.: "Phorbol ester-induced activation of a membrane-bound candidate protransforming growth factor-a converting enzyme." J.Biol.Chem.269. 20305-20311 (1994)
[Publications] K.Ohashi,et al.: "Molecular cloning and in situ localization in the brain of rat Sky receptor tyrosine kinase." J.Bichem.117(in press). (1995)
[Publications] K.Mizuno,et al.: "Comprehensive Endocrinology,The Pituitary Gland,2nd.ed." Raven Press, 520 (1995)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

c-Metプロトオンコジーンファミリーのリガンドの解明

Principal Investigator

水野 健作 九州大学, 理学部, 助教授 (70128396)

Research Products

[Publications] K.Mizuno,et al.: "Hairpin loop and second kringle domain are essenitial sites for heparin-binding and biological activity of hepatocyte growth factor." J.Biol.Chem.269. 1131-1136 (1994)

[Publications] K.Ohashi,et al.: "Cloning of the cDNA for a novel receptor tyrosine kinase,Sky,predominantly expressed in brain." Oncogene. 9. 699-705 (1994)

[Publications] K.Mizuno,et al.: "Identification of a human cDNA encoding a novel protein kinase with two repeats of the LIM/double zinc finger motif." Oncogene. 9. 1605-1612 (1994)

[Publications] K.Ohashi,et al.: "Molecular cloning of a chicken lung cDNA encoding a nocvel protein kinase with N-terminal two LIM/double zinc finger motif." J.Biochem.116. 636-642 (1994)

[Publications] T.Harano,et al.: "Phorbol ester-induced activation of a membrane-bound candidate protransforming growth factor-a converting enzyme." J.Biol.Chem.269. 20305-20311 (1994)

[Publications] K.Ohashi,et al.: "Molecular cloning and in situ localization in the brain of rat Sky receptor tyrosine kinase." J.Bichem.117(in press). (1995)

[Publications] K.Mizuno,et al.: "Comprehensive Endocrinology,The Pituitary Gland,2nd.ed." Raven Press, 520 (1995)

水野健作九州大学, 理学部, 助教授 (70128396)