1994 Fiscal Year Annual Research Report

ets群遺伝子E1A-Fによるマトリックスメタロプロテアーゼ転写活性化と転移能

Research Project

Project/Area Number	06280230
Research Institution	Sapporo Medical University
Principal Investigator	藤永けい札幌医科大学, 医学部, 教授 (10045338)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山下利春札幌医科大学, 医学部, 講師 (50167706) 澤田幸治札幌医科大学, 医学部, 助教授 (80111128)
Keywords	ets群遺伝子 / 細胞外マトリックス分解酵素 / MMP / 転写調節因子 / トランス型転写活性化 / アデノウイルスE1Aエンハンサー
Research Abstract	1.E1AFによる細胞外マトリックス分解酵素遺伝子(MMP)の転写活性化: 細胞外マトリックス分解酵素のプロモーターを組み込んだCATレポーターを構築し、E1AF遺伝子発現プラスミドとのcotransfection法で検討した。その結果、E1AFは3種類のMMP遺伝子のプロモーター活性を10-20倍促進した。E1Aが間質コラーゲンを基質とするtype1コラゲナーゼ、基底膜コラーゲンを分解する92kD typeIVコラゲナーゼ、プロテオグリカンなどを分解するストロメリシンなど、細胞外マトリックス分解酵素のプロモーター活性をいづれも10-20倍、促進することを見い出した。特に、ets群転写因子による92kD typeIVコラゲナーZゼの活性は、本研究が最初である。 2.E1AF遺伝子やMMP遺伝子の発現: 細胞質RNAを抽出し、それぞれ特異的cDNAプローブを用いてノーザン法で検討した結果、浸潤/転移能が高い細胞にE1AF、および92KD typeIVコラゲナーゼ遺伝子の発現を確認した。 3.E1AF発現細胞の樹立と運動能、浸潤能の測定: 低浸潤能、低運動能のヒト乳癌細胞株に、E1AF発現プラスミドとG418マーカー遺伝子をcotransfectionし、G418耐性を利用してE1AF発現細胞株を分離した。細胞の運動能と浸潤能はフィブロネクチンをchemoattractantに使い、それぞれTranswellチャンバーとMatrigelinvasionチャンバーを用いて測定した。その結果、E1AF発現細胞に運動能と浸潤能の増大が見られた。。つまり、E1AF遺伝子のトランスフェクションによって、ヒト乳癌細胞を運動能ち浸潤能が高い細胞に変換できた。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Fujinaga,Y: "Sequence variation of human papillomavirus type 16 E7 in preinvasiveand invasive cervical neoplasias." Virus Gene. 9. 85-92 (1994)
[Publications] Sawada,Y: "Identification of functional domains of adenovirus tumor-specific antigen in type 5 and 12 by viable viruses carrying chimeric E1A gene." Int.J.Cancer. 57. 598-603 (1994)
[Publications] Hotsubo,T: "Detection of human cytomegalovirus DNA in breast milk by means of polymerase chain reaction." Microbiol.Immunol.38. 809-811 (1994)
[Publications] Ishida,S: "Unsual splice sites in the E1A-E1B cotranscripts synthesized in adenovirus type 40-infected Ad549 cells." Arch.Virol.139. 389-402 (1994)
[Publications] Yoshida,K.: "Transcriptional regulation of the adenovirus R1A gene." Current Topics Microbiol.Immunol.(in press).
[Publications] Higashino,F.: "Ets-related protein E1A-F can activate three different matrix metalloproteinase gene promoters." Oncogene. (in press). (1995)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

ets群遺伝子E1A-Fによるマトリックスメタロプロテアーゼ転写活性化と転移能

Principal Investigator

藤永 けい 札幌医科大学, 医学部, 教授 (10045338)

Research Products

[Publications] Fujinaga,Y: "Sequence variation of human papillomavirus type 16 E7 in preinvasiveand invasive cervical neoplasias." Virus Gene. 9. 85-92 (1994)

[Publications] Sawada,Y: "Identification of functional domains of adenovirus tumor-specific antigen in type 5 and 12 by viable viruses carrying chimeric E1A gene." Int.J.Cancer. 57. 598-603 (1994)

[Publications] Hotsubo,T: "Detection of human cytomegalovirus DNA in breast milk by means of polymerase chain reaction." Microbiol.Immunol.38. 809-811 (1994)

[Publications] Ishida,S: "Unsual splice sites in the E1A-E1B cotranscripts synthesized in adenovirus type 40-infected Ad549 cells." Arch.Virol.139. 389-402 (1994)

[Publications] Yoshida,K.: "Transcriptional regulation of the adenovirus R1A gene." Current Topics Microbiol.Immunol.(in press).

[Publications] Higashino,F.: "Ets-related protein E1A-F can activate three different matrix metalloproteinase gene promoters." Oncogene. (in press). (1995)

藤永けい札幌医科大学, 医学部, 教授 (10045338)