1994 Fiscal Year Annual Research Report
分化・増殖の制御におけるプロテインホスファターゼ2Cの機能に関する細胞工学的解析
Project/Area Number |
06281204
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
田村 眞理 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (20124604)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 孝安 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (10221970)
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Keywords | プロテインホスファターゼ / 分子多様性 / 選択的スプライシング / 精子形成 |
Research Abstract |
我々はこれまでに、ラット及びマウスのPP2CαcDNA、およびマウスPP2Cβの5種類のイソフォーム(PP2Cβ-1,-2,-3,-4および-5)をコードするcDNAを単離し、それらの解析を行ってきた。その結果、PP2CαおよびPP2Cβは異なった遺伝子産物であること、およびPP2Cβの5種類のイソフォームは、単一のpre-mRNAからの選択的スプライシングによって生ずることが判明した。それらのスプライシング部位は同じであり、スプライシングの結果生ずる5種類のイソフォームは、C末端の十数個のアミノ酸配列のみが異なっていた。 ノーザン解析の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1のmRNAシグナルは、マウスの諸臓器に普遍的に発現していた。これに対し、PP2Cβ-2は脳と心筋のみに、またPP2Cβ-3,-4および-5は精巣と小腸のみに選択的に発現していた。特異抗体を用いたマウス脳の免疫組織染色の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1はニューロンとグリアの両方に発現しているのに対し、PP2Cβ-2はニューロンにのみ発現していることが明らかとなった。また、マウス胚性幹細胞や胚性始原生殖細胞では、PP2Cβ-1のmRNAシグナルが強いのに対し、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは極めて低レベルであった。これに対し、精巣では、それらのシグナルの強度が逆転していた。さらに精巣のin situハイブリダイゼーションの結果、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは、精細管内部の生殖細胞に検出された。以上の結果から、これらのイソフォームは精子形成の制御に関わっている可能性が示唆された。
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[Publications] Murakami,T.: "Characterization of multiple molecular forms of Mg^<2+>-dependent protein phosphatase from Saccharomyces cerevisiae." J.Biochem.115. 762-766 (1994)
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[Publications] Abe,H.: "Localization of mRNA for protein phosphatase 2A in the brain of adult rats." Mol.Brain Res.22. 139-143 (1994)
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[Publications] Kato,S.: "The cDNA sequence encoding mouse Mg^<2+>-dependent protein phosphatase α." Gene. 145. 311-312 (1994)
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[Publications] Yokoyama,N.: "Involvement of type 2C phosphatase in the dephosphorylation of 26kDa phosphoprotein in rat parotid acinar cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.200. 497-503 (1994)
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[Publications] Higuchi,T.: "A method for determination of galactosyltransferase I activity synthesizing the proteoglycan linkage region." J.Biochem.Biophys.Methods. 29. 135-142 (1994)
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[Publications] Kato,S.: "Molecular cloning and expression of mouse Mg^<2+>-dependent protein phosphatase β-4(Type 2Cβ-4)." Arch.Biochem.Biophys.(in press).
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[Publications] 小林 孝安: "プロテインホスファターゼ2Cの細胞における機能" 実験医学. (印刷中).