Tecチロシンキナーゼを介する細胞増殖機構

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06281255
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 間野 博行 自治医科大学, 医学部, 講師 (90240704)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 本田 浩章 自治医科大学, 医学部, 助手 (40245064) ; 堺 隆一 自治医科大学, 医学部, 助手 (40215603)
• Keywords: チロシンキナーゼ / サイトカイン

Research Abstract

チロシンキナーゼは一般に細胞の増殖分化に直接的に関わっていると考えられている。本研究計画において我々は細胞内におけるTecチロシンキナーゼと会合する蛋白質群の同定を試みると同時に、骨髄球系細胞に働くサイトカインの細胞内シグナル伝達機構におけるTecの関与を検討した。(1)Tecのサイトカインによる活性化:マウスIL-3依存性細胞株BaF3にc-Kit,Flt3/Flk2,gp130,G-CSF受容体cDNAをそれぞれ導入し安定導入株を得た。親株を含めたこれらの細胞をそれぞれIL-3,stem cell factor,Flt3/Flk2 ligand,IL-6+IL-6receptor alpha chain soluble form,G-CSFで刺激するといずれの系においてもTecは刺激依存症にチロシンリン酸化することが判った。しかもTecに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与しTec発現量を低下させると、細胞増殖は押さえられた。従ってTecキナーゼは細胞増殖機構に関与すると考えられた。(2)THドメインと会合する蛋白質群:ヨード化したGST-THドメイン融合蛋白質をプローブとして,λgt11発現ライブラリーをスクリーニングした結果、サイトカイン受容体および既知の細胞内シグナル伝達物質cDNAが複数単離された。従ってTHドメインは蛋白質-蛋白質間相互作用を司るユニットと考えられた。
本研究によって (1)Tecキナーゼがサイトカインによる細胞増殖機構に関与すること、(2)THドメインは細胞内蛋白質間の会合に深く関わること、が世界に先駆けて明らかになった。Tecと相互作用を及ぼす細胞内蛋白質を明らかにすることによって、細胞増殖機構に関する新たな視点からの知見が得られると予想される。

Research Products

• [Publications] Mano,H.et al.: "Tec protein-tyrosine kinase is involved in IL-3 signaling pathway" Blood. 85. 343-350 (1995)
• [Publications] Matsuda,T.et al.: "Association and activation of Btk-Tec kinases by gp130,a sigual transducer of the IL-6 family of cytokws" Blood. 85. 627-633 (1995)
• [Publications] Mano,H.et al.: "Tec protein-tyrosine kinase directly associates with Lyn protein-tyrosine kinase through its N-terminal unique domain" Oncogene. 9. 3205-3212 (1994)
• [Publications] Tong,B.et al.: "Tec kinase associates with c-Kit and with tyrosine phosphorylated and cultivated following stem cell factor binding" Mol.Cell.Biol.14. 8432-8437 (1994)
• [Publications] Sato,K.et al.: "Molocular cloning and analysis of the human Tec protein-tyrosine kinase" Leukemia. 8. 1663-1672 (1994)