1994 Fiscal Year Annual Research Report

熱ショック・ストレス蛋白質の機能・発現機構とその制御

Research Project

Project/Area Number	06282121
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	野瀬清昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平岡真寛京都大学, 医学部, 助教授 (70173218) 吉開泰信名古屋大学, 医学部, 教授 (90158402) 渡辺直樹札幌医科大学, 医学部, 助教授 (10158644) 中井彰京都大学, 胸部疾患研究所, 助手 (60252516)
Keywords	熱ショック蛋白 / シャペロン / 温熱療法
Research Abstract	低分子熱ショック蛋白質(hsp27)の増殖における機能につき、発現ベクターを用いた解析からhsp27高発現は増殖を抑制する可能性が示唆された。hsp27の各種変異体を用い、この増殖抑制には燐酸化およびC-末端での凝集体形成が関与することが示された(野瀬)。分泌経路の阻害剤で細胞を処理し、hsp47とコラーゲンとの結合、解離部位はゴルジ体以降で解離することが明らかとなった。また、この結合解離定数は定常状態では10^<-7>程度であることを示した(中井)。hsp90はカゼインキナーゼIIの活性サブユニットαのヘパリン結合部位に結合し、複合体を形成することを明らかした。またSV40T抗原とhsp90との複合体の再構成に成功した(宮田)。生存率でみた温熱耐性の程度と、hsp40,hsp70の細胞内含量とはいずれもよく相関し、hsp40も温熱耐性の良いマーカーとなることを示した。また、hsp70とhsp40が複合体を形成していることが明らかとなり、これらがシャペロンとして機能することが示された(大塚)。極低磁場を培養細胞に負荷し、hsp70の発現を見たが、HeLa,CHO細胞いずれにおいても発現上昇は見られなかった。また、マウスの移植腫瘍に加温処理を行い、hsp70のレベルを見たところ腫瘍周辺部で顕著な上昇が見られた(平岡)。細胞内に存在する腫瘍壊死因子(TNFα)が、細胞を加温した時の熱ショック因子(HSF1)のHSEへの結合能を増強させ、その結果hsp72の発現を高めることを見い出した。HSF1の結合能の増強は、細胞内TNFが直接HSF1に作用するわけではないことが示されている(渡辺)。U937細胞から核抽出液を調整し、hsc70遺伝子転写調節領域のDNA断片と結合する蛋白因子を検索し、増殖状態で異なったゲルシフトバンドが検出された。蛋白因子を精製して解析した結果、共通の蛋白質(分子量71,62kDa)が検出された(丸野内)。マウスリンパ節からγδ型T細胞をクローニングし、Vδ6またはVδ5を発現する2種のクローンを得た。Vδ6T細胞はhsp65と反応し、Vδ5T細胞はMethA繊維肉腫に反応性を示し、その反応性は抗hsp65抗体で阻害された(吉開)。カテプシンLの転写制御において、通常条件ではSp1が関与するが、誘導時にはEgr-1が転写制御領域に結合することが示された(石堂)。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Arata.S.et al.: "Effects of overexpression of the small molecular weight heat shock protein on the sensitivity of human fibroblasts exposed to oxidative stress" J.Cell.Physiol.(in press). (1995)
[Publications] Shibanuma,M.et al: "Characterization of the TGFβ1-inducible hic-5 gene that encodes a putative zinc-finger protein and its involvemeat in cellular senescence" J.Biol.Chem.269. 26767-26774 (1994)
[Publications] Frydmcm,J.et al: "Folding of nascent polypeptide chains in a high molecular mas assembly with molecular chaperons" Hatule. 370. 111-117 (1994)
[Publications] Maeda,M.et al: "Endogenous tumoi necrosis factor as a restsrant factor eunction against adriamycin" Int.J.Cancer. 58. 376-379 (1994)
[Publications] Csermely,p.et al: "Autophosphoiglation of grδ94(endoplasmin)" J.Biol.Chem.(in press). (1995)
[Publications] Tomida,S.et al.: "ICAM-1 and LFA-1 are involved in protection mediated by γδT cells at the early stage after infection Lisreria monolytotencsin" Int.Immunol.6. 955-962 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

熱ショック・ストレス蛋白質の機能・発現機構とその制御

Principal Investigator

野瀬 清 昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)

Research Products

[Publications] Arata.S.et al.: "Effects of overexpression of the small molecular weight heat shock protein on the sensitivity of human fibroblasts exposed to oxidative stress" J.Cell.Physiol.(in press). (1995)

[Publications] Shibanuma,M.et al: "Characterization of the TGFβ1-inducible hic-5 gene that encodes a putative zinc-finger protein and its involvemeat in cellular senescence" J.Biol.Chem.269. 26767-26774 (1994)

[Publications] Frydmcm,J.et al: "Folding of nascent polypeptide chains in a high molecular mas assembly with molecular chaperons" Hatule. 370. 111-117 (1994)

[Publications] Maeda,M.et al: "Endogenous tumoi necrosis factor as a restsrant factor eunction against adriamycin" Int.J.Cancer. 58. 376-379 (1994)

[Publications] Csermely,p.et al: "Autophosphoiglation of grδ94(endoplasmin)" J.Biol.Chem.(in press). (1995)

[Publications] Tomida,S.et al.: "ICAM-1 and LFA-1 are involved in protection mediated by γδT cells at the early stage after infection Lisreria monolytotencsin" Int.Immunol.6. 955-962 (1994)

野瀬清昭和大学, 薬学部, 教授 (70012747)