1996 Fiscal Year Annual Research Report
リン脂質代謝関連蛋白及びSH_2/SH_3領域による細胞増殖制御
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06283202
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
竹縄 忠臣 東京大学, 医科学研究所, 教授 (40101315)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
深見 希代子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40181242)
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| Keywords | Ash / Grb-2 / SH_2 / SH_3 / Ras |
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| Research Abstract |
チロシンキナーゼ情報伝達系に重要な役割を果たすAsh/Grb2はSosを介してRasを活性化し、増殖シグナルを核へ送るキイのアダプター蛋白としてよく知られている。我々はRas活性化以外のAsh/Grb2の下流シグナルを明らかにするため、AshのSH_3に結合する蛋白を牛脳より精製した。採れた蛋白の部分アミノ酸配列を決め、未知の蛋白質(p150とp65)のcDNAをクローニングした。p65はWiskott-Aldrich Syndrome Protein(WASP)と50%の相同性を持ち、神経系に発現している新しい蛋白であった。この蛋白はpHドメイン、カルモジュリン結合モチーフ、CDC42結合モチーフ、プロリンに富むAsh結合部位とコフィリン様ドメインを持っていたCos細胞に発現させると、細胞膜上にラッフルを形成し、アクチンと共存していた。EGF刺激により、ラッフルはマイクロスパイクへと変わった。また、この蛋白はアクチン線維の再構成に重要な役割を果たす蛋白質であろうと考えられた。p150のcDNAをクローニングした結果、PIP_2ホスファターゼの一種で最近採られたシナプトジャニンと相同性が高かった。Cos細胞への発現はアクチン線維の消失と細胞の多核化を引き起こした。PIP_2はアクチン調節蛋白質の活性を調節することが知られているので、さらにこのPIP_2ホスファターゼのアクチン重合への影響を調べたところ、α-アクチニンのアクチン重合を抑制した。これらの事実よりAsh/Grb2はRas活性化へシグナルを送るのみならず、細胞骨格制御へもシグナルを送っていることが明らかになった。
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[Publications] K.Fukami,et al: "Identification of a PIP2 binding site in chicken skeletal muscle α-actinin" J.Biol.Chem.271. 2646-2650 (1996)
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[Publications] S.Moriya,et al: "PDGF activates protein kinase C ε through redundant and indedundant signaling pathway involving phospholipase C γ or phosphatidylinositol 3-kinase" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 151-155 (1996)
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[Publications] K.Miura,et al: "Interaction of Ash/Grb2 via its SH3 domains with neuron-specific p150 and p65" Biochem.J.316. 639-645 (1996)
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[Publications] M.Matsuda,et al: "Interaction between the amino-terminal SH3 domain of Crk and its natural target proteins" J.Biol.Chem.271. 14468-14472 (1996)
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[Publications] H.Miki,et al: "A novel actin-depolymerizing protein N-WASP regulates thecor-tical cytoskeletal rearrangement in a PIP2 dependent manner at the downstream of tyrosine kinase" EMBO J.15. 5326-5335 (1996)
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[Publications] T.Ito,et al: "β-Tubulin binds Src homorogy 2 domains through a region different from the tyrosinephosphorylated protein-recognizing site" J.Biol.Chem.271. 27931-27935 (1996)
