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1995 Fiscal Year Annual Research Report

細胞接着と細胞増殖におけるC-キナーゼの役割

Research Project

Project/Area Number 06283222
Research InstitutionYokohama City University

Principal Investigator

大野 茂男  横浜市立大学, 医学部, 教授 (10142027)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 鈴木 厚  横浜市立大学, 医学部, 助手 (00264606)
長田 真一  横浜市立大学, 医学部, 助手 (00244484)
水野 恵子  横浜市立大学, 医学部, 助手 (90221803)
KeywordsプロテインキナーゼC / PI3キナーゼ / ホスホリパーゼC / プロテインキナーゼC結合タンパク質 / 血清飢餓 / DNA合成
Research Abstract

プロテインキナーゼC(PKC)の具体的な作用点を探る目的で、昨年度から行っていた活性化経路の同定を代表的なPKC分子種について行う作業を進め、cPKC、nPKC分子群が、PLC経路に加え、PI3-kinase経路でも活性化されることを証明した。更に、aPKC分子がPI3-kinase経路でのみ活性化されることを見いだした。PKC分子群は、リン脂質性の種々の代謝産物により、少しづつ異なったスペクトルで活性化されること、同一の分子が複数の経路により独立に活性化され得ることを見いだした事になる。一方、PKCの具体的な作用点を明らかにする目的で、組換え型精製PKCδをプローブとして大腸菌cDNA発現ライブラリーをスクリーニングし、十数種の独立のPKCδ結合タンパク質のcDNAクローンを単離同定を進めている。その中には既にPKCの基質タンパク質として知られていたMARCKSタンパク質、核膜孔のタンパク質として報告されているもの以外は全て新規のタンパク質であった。その中のいくつかについて全長のcDNAを単離構造決定した。その中の一つ、SRBCと名付けたタンパク質は、PKCに結合すると同時に、基質にもなることを試験管内、細胞レベルで確認した。更にこのmRNAは血清飢餓で誘導され、細胞周期の進行に伴って減少する。更にこれを強制高発現するとDNA合成を抑制することを見いだした。一方、PKC結合タンパク質の検索を酵母のtwo hybrid systemを用いて行い、PKCεのキナーゼドメインに結合する新規タンパク質を見いだした。このタンパク質はPKCの基質とはならないが、細胞内でのPKCの位置の決定に関わることが推測された。

  • Research Products

    (17 results)

All Other

All Publications (17 results)

  • [Publications] Morishira,R.,Nakayama,H.,Isobe,T.,Matsuda,T.,Hashimoto,Y.,Okano,T.,Fukuda,Y.,Mizuno,K.,Ohno,S.,Kozawa,O.,Kato,K.and Asano,T.: "Primary structure of a γ subunit of G protein,γ 10 and its phosphorylation by protein kinase C." J.Biol.Chem.270. 29469-29475 (1995)

  • [Publications] Ogawara,M.,Inagaki,M.,Tsujimura,K.,Takai,Y.,Sekimata,Y.,Hye Ha,M.,Imajoh-Ohmi,S.,Hirai,S.,Ohno,S.,Sugiura,H.and Yamauchi,T.: "Differential Targeting of protein kinase C and CaM kinase II signaling to vimentin." J.Cell.Biol.131. 1055-1056 (1995)

  • [Publications] Wang,F.,Naik,U.P.,Ehrlich,Y.H.,Osada,S.,Ohno,S.and Komecki,E.: "Stimulatory antibody-induced activation and selective translocation of protein kinase C isoenzymes in human platelets." Biochem.J.311. 401-406 (1995)

  • [Publications] Kinouchi,T.,Sorimachi,H.,Maruyama,K.,Mizuno,K.,Ohno,S.,Ishiura,S.and Suzuki,K.: "Conventional protein kinase C(PKC)-α and novel PKCε,but not -δ,increase the secretion of an N-terminal fragment of Alzheimer's disease amyloid precursor protein from PKC cDNA transfected 3Y1 fibrobrasts." FEBS Lett.364. 203-206 (1995)

  • [Publications] Ichikawa,S.,Hatanaka,H.,Takeuchi,Y.,Ohno,S.and Inagaki,F.: "Solution structure of cysteine-rich domain of protein kinase C α." J,Biochem.117. 566-574 (1995)

  • [Publications] Mizuno,K.Noda,K.,Ueda,Y.,Hanaki,H.,Saido,T-C.,Suzuki,K.,Ikuta,T.,Kuroki,T.,Tamaoki,T.,Hirai,S-I.,Osada,S.and Ohno,S.: "UCN-01,an anti-tumor drug,is a selective inhibitor of the conventional PKC subfamily." FEBS Lett.359. 259-261 (1995)

  • [Publications] Hirano,M.,Hirai,S-I.,Mizuno,K.,Osada,S.,Hosaka,M.and Ohno,S.: "A protein kinase C isozyme,nPKCε,is involved in the activation of NF-κB by 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)in rat 3Y1 fibroblasts." Biochem.Biophys.Res.Commun.206. 429-436 (1995)

  • [Publications] Ohno,S.and Suzuki,K.: "YKR2 PK(S.cerevisiae)." The protein kinase factbook,Academic Press Limited.80-88 (1995)

  • [Publications] Hirano,M.,Osada,S.,Aoki,T.,Hirai,S.,Hosaka,M.,Inoue,J.and Ohno,S.: "MEK kinase is involved in TNF α-mediated activation of NFkB and degradation of IkB α." J.Biol.Chem.(in press).

  • [Publications] Akimoto,K.,Takahashi,R.,Moriya,S.,Nishioka,N.,Takayanagi,J.,Kimura,K.,Fukui,Y.,Osada,S.,Mizuno,K.,Hirai,S.,Kazlauskas,A.and Ohno,S.: "EGF and PDGF receptors activate atypical PKCλ through phosphatidylinositol 3-kinase." EMBOJ.(in press).

  • [Publications] Ueda,E.,Ohno,S.,Kuroki,T.,Livneh,E.,Yamada,K.,Yamanishi,K.,Yasuno,H.: "The η isoform of protein kinase C mediates transcriptional activation of the human transglutaminase 1 gene." J.Biol.Chem.(in press).

  • [Publications] Hirai,S.,Izawa,N.,Osada,S.,Spyrou,G.and Ohno,S.: "Activation of the JNK pathway by distantly related protein kinases,MEKK and MUK." Oncogene. 12. 641-650 (1996)

  • [Publications] Moriya,S.Kazlauskas,A.,Akimoto,K.,Hirai,S.,Mizuno,K.,Takenawa,T.,Fukui,Y.,Watanabe,Y.,Ozaki,S.and Ohno,S.: "PDGF activates protein kinase C ε through redundant and independent signaling pathways involving phosphpholipase Cγ or phosphatidylinositol 3-kinase." Proc Natl.Acad.Sci.U.S.A.93. 151-155 (1996)

  • [Publications] Suzuki,S.,Sorimachi,H.,Ishiura,S.and Ohno,S.: "Two family members of calpain:ubiquitous and tissue specific calpains." Expression of tissue proteinases and regulation of protein degradation as related to meat quality.,ECCEAMST,The Netherlands. 5-15 (1995)

  • [Publications] Nishioka,N.,Hirai,S.,Mizuno,K.,Osada,S.,Suzuki,A.,Kosaka,K.,and Ohno,S.: "Wortmannin inhibits the activation of MAP kinase following Vasopressin V1 receptor stimulation." FEBS Lett.377. 393-398 (1995)

  • [Publications] Nishioka,N.,Akimoto,K.,Moriya,S.,Takayanagi,J.,Fukui,Y.,Hirai,S.,Mizuno,K.,Kosaka,K.and Ohno,S.: "Phosphatidylinositol 3-kinase is involved in TRE-dependent gene expression in response to arginine vasopressin." Biochem.Biophys.Res.Commun.215. 1037-1042 (1995)

  • [Publications] Ohno,S.and Suzuki,K.: "Protein kinase C(vertebrates)Ca^<2+> & phospholipid-dependent protein kinase." The protein kinase factbook,Academic Press Limited.107 (1995)

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Published: 1997-02-26   Modified: 2016-04-21  

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