サイトカイン遺伝子を中心とした遺伝子治療の基礎的研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06283227
• Research Institution: Japanese Foundation For Cancer Research
• Principal Investigator: 濱田 洋文 財団法人癌研究會, 癌化学療法センター・分子生物治療研究部, 部長 (00189614)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 角田 力弥 福島県立医大, 解剖学2, 助教授 (40045779) ; 山口 聡 財団法人癌研究會, 癌化学療法センター・分子生物治療研究部, 研究員 (00280628) ; 花田 賢一 財団法人癌研究會, 癌化学療法センター・分子生物治療研究部, 研究員 (70280625)
• Keywords: 免疫遺伝子治療 / 自殺遺伝子導入療法 / レトロウイルス / アデノウイルス / 抗原提示細胞 / 癌免疫 / サイトカイン遺伝子 / T細胞活性化

Research Abstract

本研究では、各種組織由来の難治性の癌に対する効果的な治療法の開発を目的として、レトロウイルス、アデノウイルスなどの組み換えウイルスベクターを用いて(A)サイトカイン遺伝子を導入発現させた腫瘍ワクチンによる免疫制御、並びに(B)自殺遺伝子を腫瘍細胞へ導入することによる細胞障害誘導を中心に遺伝子治療法開発のための基礎的研究を行って来た。当期間中の研究により、以下のような結果を得ている。
(A)腫瘍ワクチン療法:(a)本研究では、最も強力な抗原提示細胞である樹状細胞(DC)による腫瘍特異的なT細胞活性化の分子メカニズムを解析した。DCは他の抗原提示細胞が持たないT細胞活性化早期に働く共刺激能を持ち、その活性はマクロファージとの協調で更に強化された。早期共刺激を修飾するモノクローナル抗体を用いた発現クローニングによりCD82が抗原提示細胞とT細胞の接着、CD28と協調するシグナル伝達、の二面からT細胞活性化の初期に働くことを見いだした。(b)腫瘍ワクチン療法に用いるウイルスベクター系の開発を目的として、選択マーカーとの2重発現、VSVG偽型レトロウイルス、アデノウイルスを用いた誘導発現などのシステムを樹立した。
(B)自殺遺伝子導入療法:自殺遺伝子を組織固有のプロモーター(AFPやCEAのプロモーター)の制御下に発現するような組み換えアデノウイルスを作成し、肝癌、大腸癌、胃癌などのモデルを用いて治療効果を検討した。組織固有のプロモーターを用いることによって、癌細胞特異的に遺伝子導入細胞を殺すことが可能であった。また、大腸菌のUP遺伝子(uracil phosphoribosyl transferase)の導入発現により、胃癌などの細胞株への5FUの毒性をIC_<50>で約20倍増強出来ることを見出した。

Research Products

• [Publications] Abe,J.Hamada,H.et al.: "In vivo antitumor effect of cytotoxit T lymphocytes engineered to produce interferon-r by adenovirus-mediated genetic..." Biochem.Biophys.Res.Commun.218. 164-170 (1996)
• [Publications] Wakimoto,H.,Hamada,H.,et al.: "Intensified antitumor immunity by a cancer vaccine that produces granulocytemacrophage colony-stimulating factor..." Cancer Research. 56. 1828-1833 (1996)
• [Publications] Kanai,F.,Hamada,H.,et al.: "Gene therapy for alpha-fetroprotein-producing human hepatoma cells by adenovirus-mediated transfer of herpes simplex..." Hepatology. 23. 1359-1368 (1996)
• [Publications] Lan,K.-H.,Hamada,H.et al.: "Gene therapy for carcinoembryonic antigen-producing human gastric cancer cells by adenovirus-mediated expression of..." Gastroenterology. 111. 1241-1251 (1996)
• [Publications] Tanaka,T.,Hamada,H.et al.: "Adenovirus-mediated prodrug gene therapy for carcinoembryonic antigen-producing human gastric carcinoma cell in vitro." Cancer Research. 56. 1341-1345 (1996)
• [Publications] Kato,K.,Hamada,H.,et al.: "Local production of the p40 subunit of interleukin 12 suppresses T-helper 1-mediated immune responses and prevents.." Pro.Natl.Acad.Sci.U.S.A.93. 9085-9089 (1996)
• [Publications] Osawa,M.,Hamada,H.et al.: "Long-term lymphohematopoietic reconstitution by a single CD34low/hemopoietic stem cell." Science. 273. 242-245 (1996)
• [Publications] Hanada,K.,Hamada,H.et al.: "CM-CSF-induced in vivo expansion of splenic dendritic cells and their functional characterization." J.Leukocyte Bio.60. 181-190 (1996)
• [Publications] Nishio,N.,Hamada,H.,et al.: "Chances in markers,receptors,and adhesion molecules expressed on murine hemopoietic stem cells after a single injection of..." Stem Cells. 14. 584-591 (1996)
• [Publications] Sato,Y.,Hamada,H.et al.: "Augmented anti-tumor effects of killer cells induced by tumor necrosis factor gene-transduced autologous tumor cells..." Human Gene Therapy. 7. 1895-1905 (1996)
• [Publications] Kanai,F.,Hamada,H.et al.: "In vivo gene therapy for a-fetroprotein producing hepatocellular carcinoma by adenovirus-mediated transfor of cytosine..." Cancer Research. 57. 461-465 (1997)
• [Publications] Wakimoto,H.,Hamada,H.et al.: "Efficient retrovirus-mediated cytokine-gene transduction of primary-cultured human glioma cells for tumor vaccination.." Japanese Journal of Cancer Research. (in press).
• [Publications] Yoshida,Y.,Hamada,H.et al.: "Adenovirus-mediated inducible gene expression through tetracycline-control-lable transactivator with nuclear..." Biochem.Biophys.Res.Commun.230. 426-430 (1997)
• [Publications] Yoshida,Y.,Hamada,H.et al.: "VSVG-pseudotyped retroviral packagingthrough adenovirus-mediated inducible gene expression." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).