転写制御因子からみた骨髄性白血病細胞における分化停止機構の分子生物学的解析

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06404039
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (A)
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 浅野 茂隆 東京大学, 医科学研究所, 教授 (50134614)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小林 幸夫 東京大学, 医科学研究所, 助手 (50240734) ; 東條 有伸 東京大学, 医科学研究所, 助手 (00211681) ; 谷 憲三郎 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00183864) ; 小澤 敬也 自治医科大学, 医学部, 教授 (30137707) ; 佐藤 典治 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (90162461)
• Keywords: 骨髄細胞分化マーカー / GIG-1蛋白 / 好中球系細胞 / NK細胞 / BCR / ABL遺伝子 / Evi-1遺伝子 / 転写活性因子

Research Abstract

(1)新しい骨髄細胞分化マーカー遺伝子、GIG-1蛋白細胞内局在の決定とその生物学的機能の解析:顆粒球コロニー刺激因子により発現が誘導されるGIG-1のcDNA配列より予想される20アミノ酸の合成ペプチド4種に対する抗GIG-1ペプチド抗血清を作製し、各種血球ならびに白血病細胞の免疫染色を行った。これによるとGIG-1タンパク質は好中球系細胞およびNK細胞等の細胞質顆粒および細胞膜に存在することが確認された。これら殺細胞機能を有する細胞に共通して発現することより、本タンパクを発現させ殺細胞機能の有無を検討していく予定である。(2)株化細胞へのBCR/ABL遺伝子の導入による細胞生物学的性状変化の検討:TF-1細胞(ヒトGM-CSF依存性細胞株)へBCR/ABL遺伝子を導入し、GM-CSF(顆粒球マクロファージコロニー刺激因子)ならびにインターフェロン-α(IFN)への反応性を検討したところ、BCR/ABL発現細胞株でGM-CSFに非依存的に増殖するクローンが単離された。この中にはオートクラインもしくは自律増殖をとる2種のクローンがあり、前者はIFNに感受性があり、後者は抵抗性であった。現在これらのクローンの分子生物学的検討を行っている。(3)Evi-1遺伝子により制御される遺伝子の検索:Evi-1遺伝子は2つのDNA結合領域をもち、それぞれGATA結合配列および、ets結合配列を認識結合できた。そしてこの際、隣り合うAP-1結合たんぱくとの共同作業により、VL30の転写活性を上昇させることがわかった。以上のような急性白血病化への分子生物学的解析結果をもとに、今後白血病細胞が有する分化停止能の解除にむけての検討を行っていく予定である。

Research Products

• [Publications] Nakamura,Y.,Kanegae Y.,et al: "Doptive immunogene therapy with murine tumor-specific T lymphocytes engineered to secrete inter leukin-2." Canser Res. 54. 5757-5760 (1994)
• [Publications] Tani,K.,Asano,S.,et al.: "Retrovirus-mediated gene transfer of human pyruvate kinase(PK)cDNA into murine hematopoietic cells:Implication for gene therapy of human PK deficiency." Blood. 83. 2305-2310 (1994)
• [Publications] Yoshikubo,T.,Ozawa,K.,et al.: "Adhesion of NFS-60 myeloid leukemia cells to MC3T3-G2/PA6 stromal cells induces granulocyte colony-stimulating factor production." Blood. 84. 415-420 (1994)
• [Publications] Azuma,M.,et al.: "B70/B7 is identical to CD86 and is the major functional ligand for CD28 expressed on human dendritic cells." J.Exp.Med.180. 1841-1847 (1994)
• [Publications] Lavy,E.R.,Morishita,K.,et al.: "DNA rearrangements distal to the Evi-1 locus associated with 3q21q26 syndrome." Blood. 83. 1348-1352 (1994)
• [Publications] Morishita,K.,et al.: "EVI-1 zinc finger protein waorks as a transcriptional via binding to a consensus sequence of GACAAGATAAGATAAN_1-_<28>CTCATCTTC." Oncogene. (in press). (1995)
• [Publications] Tani,K.,Asano,S.,et al.: "Cancer Chemotherapy:Challenges for the future 9" Excerpta Medica,Amsterdam, 115-125 (1994)
• [Publications] Asano,S.,and Tani,K.: "Cancer Chemotherapy:Challenges for the future 9" Excerpta Medica,Amsterdam, 213-217 (1994)