1995 Fiscal Year Annual Research Report
副腎髄質ホルモン分泌の細胞内カルシウム貯蔵部位による制御機構
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06454121
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| Research Institution | HOKKAIDO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
中里 幸和 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (60001525)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 茂男 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (40109509)
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| Keywords | ATP / 副腎髄質細胞 / カルシウム電流 / シクロピアゾン酸 / GTPアナログ / カテコールアミン放出 / カルシウムストア / 全細胞電位固定法 |
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| Research Abstract |
1.Ca再導入によるカテコールアミン(CA)放出に対するCa貯蔵部位(ストア)枯渇薬の作用:副腎をCa欠除液で一定時間灌流した後にCaを再導入すると,著明なCA放出効果が得られるが,この機序は未だ解明されていない。そこで,この反応を指標として,Caストア枯渇薬の作用を調べた.先ず細胞外Naを除去した条件下で上記の観察を行ったところ,Ca再導入ではCA放出は起こらず,むしろ自発性放出は抑制され,Ca導入の停止と同時に放出が引き起こされた。同様の実験をCaストア枯渇薬処置下で行ったところ,細胞外Na存在下と同様にCaの導入によってCA放出が引き起こされた.
2.単一細胞内Caストア依存性の細胞内Ca([Ca]i)動態とイオンチャネル活性:イノシトール3燐酸の細胞内投与並びにタプシガ-ジンは共に[Ca]iを増加させ、後者によっては著明な内向き電流が惹起された。これらの結果は,申請者らが平滑筋細胞で明らかにした細胞内Caストア枯渇によるCa流入機構が副腎髄質細胞においても存在していることを示唆している.現在、パッチクランプ法により、Caストア枯渇薬誘発性の内向き電流に関与するイオンチャネルを固定するため、更に検討している。
3.ATPによる電流反応とCaチャネル制御作用:ATPは濃度依存性及び細胞外Ca依存性にCAを放出させた。またATPは非選択的陽イオンチャネルを活性化して内向き電流を誘発すると共に、脱分極誘発性Ca電流を抑制した.この抑制はATPによる内向き電流の振幅に従って増大したが,細胞内に高濃度のEGTAが存在する場合はこの様な増大効果は見られなかった.このCa電流に対する作用は,GTPアナログの細胞内透析により抑制された.これらの結果から,ATPは非選択的イオンチャネルを介してCaを細胞内に流入させ,このCaがG蛋白が関与する機構を介して,電位依存性Caチャネルを不活化することが示唆された.
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[Publications] Toshio Ohta: "Characterization of cytosolic Ca^<2+> mobilization activated by muscarinic and nicotinic receptors in adrenal chromaffin cells of the guinea pig." Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 72 Suppl.1. 377 (1994)
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[Publications] Yoshikazu Nakazato: "Effects of adenosine 5′-triphosphate(ATP)on catecholamine secretion and membrane currents in adrenal chromaffin cells of the guinea-pig." Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 72 Suppl.1. 428 (1994)
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[Publications] Toshio Ohta: "Ca^<2+> entry activated by emptying of intracellular Ca^<2+> stores in ileal smooth muscle of the rat." British Journal of Pharmacology. 114. 1165-1170 (1995)
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[Publications] Tadashi Asano: "Muscarinic receptor subtypes mediating catecholamine secretion and increase in intracellular Ca^<2+> concentration in adrenal chromaffin cells of the guinea pig." Journal of Veterinary Medical Science. 57. 1067-1071 (1995)
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[Publications] Tadashi Asano: "Characteristics of ATP-induced catecholamine secretion from adrenal chromaffin cells of the guinea-pig." Comparative Biochemistry & Physiology-C. 112C. 101-108 (1995)
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[Publications] Ken-ichi Otsuguro: "Modulation of calcium current by ATP in guinea-pig adrenal chromaffin cells." Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 429(in press). (1995)
