1994 Fiscal Year Annual Research Report
生殖器系におけるプロスタグランジンF_<2α>の生理的役割とその制御機構の解明
| Project/Area Number |
06454171
|
|---|
| Research Institution | Kansai Medical University |
|---|
Principal Investigator |
伊藤 誠二 関西医科大学, 医学部, 教授 (80201325)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂本 和一 大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部(分子生物学), 研究員 (90235169)
菅谷 純子 関西医科大学, 医学部, 講師 (30098131)
|
|---|
| Keywords | プロスタグランジンF_<2α> / 受容体 / 遺伝子 / Gq / 黄体 / CHO細胞 |
|---|
| Research Abstract |
PGF_<2α>の産生ならびにPGF_<2α>受容体の発現が発情周期や妊娠より巧妙に制御されていることは明白であるが、PGF_<2α>がどこで産生されてるのか、何がどのような機構でPGF_<2α>の産生やPGF_<2α>受容体の発現を制御しているのか、さらにPGF_<2α>はどのような機構で黄体退縮を引き起こすのか不明な点が数多く残されている。今年度は、PGF_<2α>受容体の情報伝達機構の解明とその発現がin vivo,in vitroの生殖器系でどのように調節されているかを解明することに主眼をおいた実験を行い、以下の成果を得た。
1)牛PGF_<2α>受容体cDNAをCHO細胞にトランスフェクトしてPGF_<2α>受容体を安定に発現するトランスフォーマントを作製して、PGF_<2α>がイノシトールリン脂質代謝を亢進させるが、アデニル酸シクラーゼとはカップルしないことを明らかにした。さらに、G蛋白質のαサブユニットに特異的な抗体を用いて電気生理学的にPGF_<2α>受容体はGqを介することを明らかにした。
2)PGF_<2α>受容体mRNAレベル、受容体蛋白レベルを発情周期、妊娠時期の異なる牛黄体を用いて検討し、PGF_<2α>受容体は黄体退縮期と妊娠末期を除くほとんどすべての時期に発現していること、さらにin situハイブリダイゼーションにより大きな顆粒膜細胞に限局していること明らかにした。
3)ヒト、ウシPGF_<2α>受容体遺伝子の単離に成功し、遺伝子は3つのエクソンからなること、ハプロイド当り単一コピーであることを明らかにした。
|
-
[Publications] Sakamoto,K.: "Molecular cloning and expression of the bovine prostaglandin F_<2α> receptor." J.Biol.Chem.269. 3881-3886 (1994)
-
[Publications] Mochizuki-Oda,N.: "Characterization of the substance P receptor-mediated calcium influx in cDNA transfected Chinese hamster ovary cells --A possible role of inositol 1,4,5-trisphosphate in calcium influx." J.Biol.Chem.269. 9651-9658 (1994)
-
[Publications] Ito,S.: "Prostaglandin F_<2α> receptor is coupled to Gq in cDNA-trancfected Chinese hamster ovary cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.200. 756-762 (1994)
-
[Publications] Sakamoto,K.: "Prostagrandin F_<2α> receptor." J.Lipid Med.(in press).
-
[Publications] Sakamoto,K.: "Characterization of mRNA expression of prostaglandin F_<2α> receptor in the bovine corpora lutea throughout the oestrous cycle and pregnancy." J.Reprod.Biol.(in press).
-
[Publications] Sakamoto,K.: "Characterization and chromosomal localization of human prostaglandin F_<2α> receptor gene." Eur.J.Biochem.(in press).
