1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト脂肪酸酸化系諸酵素の系統的解析法の確立と3頭酵素欠損症の病因解明

Research Project

Project/Area Number	06454175
Research Institution	Shinshu University
Principal Investigator	橋本隆信州大学, 医学部, 教授 (80009935)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	上条桂樹信州大学, 医学部・教授, 助手 (10252074) 古田秀一信州大学, 医学部・教授, 助手 (80126705) 宮沢昌子信州大学, 医学部・教授, 助手 (20020745)
Keywords	ミトコンドリア / ペルオキシソーム / 脂肪酸酸化系酵素 / 3頭酵素欠損
Research Abstract	1.酵素活性測定法の確立ミトコンドリア脂肪酸β-酸化サイクルの4段階の反応を触媒する酵素の活性測定について、酵素抽出条件、酵素の安定性、基質特異性、抗体による酵素滴定条件を検討し、患者由来の皮膚繊維芽細胞の酵素活性を測定できる条件を確立した。 2.新酵素の検索酵素活性測定法確立の過程で中鎖基質に特異性を示す新しいエノイル‐CoAヒドラターゼの存在に気づいた。本酵素活性はヒト皮膚線維芽細胞の中鎖基質活性の約70%を占める。酵素精製をおこなったところ1つはヒドラターゼと3‐CoAデヒドロゲナーゼ活性を有する2頭酵素であり、他の1つはヒドラターゼ活性のみを有する単機能酵素であることが分かった。 3.3頭酵素欠損症の病因解明 3頭酵素欠損症はヘテロであることを認めた。1群は酵素タンパク質は存在し、デヒドロゲナーゼ活性のみの欠損を認めるもので、α-サブユニット内の点変異と推定され、この変異の疫学的調査を行っている。他の群はα-サブユニットかβサブユニットの異常のため酵素タンパク質の著名な減少を認め、3つの活性とも欠損しているもので、発現実験等によって酵素複合体形成ができないサブユニットはミトコンドリア内で急速に分解されることを明らかにした。 4.ペルオキシソーム脂肪酸酸化系酵素ペルオキシソーム脂肪酸酸化系酵素の酵素活性測定法や酵素欠損症についても検索を行った。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yasuyuki Suzuki: "Novel subtype of peroxisomal acyl‐CoA oxidase deficiency and bifunctional enzyme deficiency with detectable enzyme protein:Identification by means of comple mutation analysis." Am J Human Genet. 54. 36-43 (1994)
[Publications] Takehiko Kamijo: "Structural analysis of xDNAs for subunits of human mitohondrial fatty scid β‐oxidation trifunctional protein" Biochem Biophys Res Commun. 199. 818-825 (1994)
[Publications] Toshiyuki Fukao: "Identification of a novel exonic mutation at‐13 from 5′ splice site causing exon skipping in a girl withmitochondrial acetoacetyl‐Coenzyme A thiolase deficiency" J Clin Invest. 93. 1035-1041 (1994)
[Publications] Takehiko kamijo: "Mitochondrial Trifunctional Protein Deficiency Catalytic Heterogeneity of the Mutant Enzyme in Two Patients" J Clin Invest. 93. 1740-1747 (1994)
[Publications] Masayoshi Souri: "A sensitive assay of acyl‐coenxyme A oxidase by coupling with β‐oxidation multienzyme complex" Anal Biochem. 221. 362-367 (1994)
[Publications] Lodewijk IJlst: "Molecular basis of long‐chain 3‐hydroxyacyl‐CoA dehydrogenase deficiency:identification of the major disease‐causing mutation in the α‐subunit of the mitochondrial trifunctional protein22GC06:Biochim Biophys Acta" 1215. 347-350 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト脂肪酸酸化系諸酵素の系統的解析法の確立と3頭酵素欠損症の病因解明

Principal Investigator

橋本 隆 信州大学, 医学部, 教授 (80009935)

Research Products

[Publications] Yasuyuki Suzuki: "Novel subtype of peroxisomal acyl‐CoA oxidase deficiency and bifunctional enzyme deficiency with detectable enzyme protein:Identification by means of comple mutation analysis." Am J Human Genet. 54. 36-43 (1994)

[Publications] Takehiko Kamijo: "Structural analysis of xDNAs for subunits of human mitohondrial fatty scid β‐oxidation trifunctional protein" Biochem Biophys Res Commun. 199. 818-825 (1994)

[Publications] Toshiyuki Fukao: "Identification of a novel exonic mutation at‐13 from 5′ splice site causing exon skipping in a girl withmitochondrial acetoacetyl‐Coenzyme A thiolase deficiency" J Clin Invest. 93. 1035-1041 (1994)

[Publications] Takehiko kamijo: "Mitochondrial Trifunctional Protein Deficiency Catalytic Heterogeneity of the Mutant Enzyme in Two Patients" J Clin Invest. 93. 1740-1747 (1994)

[Publications] Masayoshi Souri: "A sensitive assay of acyl‐coenxyme A oxidase by coupling with β‐oxidation multienzyme complex" Anal Biochem. 221. 362-367 (1994)

[Publications] Lodewijk IJlst: "Molecular basis of long‐chain 3‐hydroxyacyl‐CoA dehydrogenase deficiency:identification of the major disease‐causing mutation in the α‐subunit of the mitochondrial trifunctional protein22GC06:Biochim Biophys Acta" 1215. 347-350 (1994)

橋本隆信州大学, 医学部, 教授 (80009935)