可溶性スーパー抗原の作成とそれによる免疫寛容の機構の解明と臨床応用

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454219
• Research Institution: 福井医科大学
• Principal Investigator: 友成 久平 福井医科大学, 医学部, 教授 (20251986)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): ROSENWASSER オリバー.エー 福井医科大学, 医学部, 教務職員 (90262641) ; FAIRCHILD Su 福井医科大学, 医学部, 助手 (80262640)
• Keywords: the T cell receptor / mouse mammary tumor virus / V_β / positive selection / negative selection / superantigens

Research Abstract

(1)Mouse mammary tumor virus由来可溶性スーパー抗原の作成:ヒト免疫グロブリンIgGlの定常領域遺伝子とMtv7スーパー抗原遺伝子とを連結しpBOS vectorに挿入し、マウスB細胞腫瘍にトランスフェクションをした。このfusion proteinはELISA法により検出できるが、その機能は(V_β6^+T cellsの活性化)はつかまっていない。
(2)V_β4に特異的スーパー抗原の遺伝子をsequenceした。その蛋白のsequenceは今まで知られているものとC末端(V_βとinteractionする場所)が異なった。他のスーパー抗原と比較してV_β3特異的スーパー抗原と最も類似性が高かった。
(3)V_β8.2とV_β8.3の両方に反応するモノクローナル抗体と、V_β8.3のみに反応するものを樹立した。これらの抗体はCzechIIマウスのV_β8.3と反応しないがF23.1抗体とは反応するT cellsの存在により、V_β8.3にはpolymorphismが存在することが判明した。現在、CzechIIマウスよりV_β8.3^+T hybridomaを作成しV_β8.3 sequenceを決定中である。17系統のマウスをこれらの抗体で調べたが、これらのマウスにはV_β8.2,V_β8.3に対するスーパー抗原は存在しなかった。
(4)V_β4に対する他のスーパー抗原、V_β8.2に対する内因性スーパー抗原についてもそのsequenceを決定中である。これらについては既に、Southern blotにより、そのスーパー抗原遺伝子を同定済である。
(5)V_β4,V_β8.2を発現するT hybridoma cellsを作製した。これらV_βに対するスーパー抗原遺伝子のトランスフェクションをして、これらT hybridoma cellsの活性化により特異性の証明を行っている。
(6)本来V_β4特異的スーパー抗原をcodeする遺伝子は内因性のものと考えられた。ところが、この遺伝子が外因性の感染性mouse mammary tumor virusにco-packagingされたことを示す間接的証拠が得られた。さらにRecombinationが感染性mouse mammary tumor virusとの間でおこっているのか否かを検索中である。

Research Products

• [Publications] Fairchild,Susan.P.: "Localization of the mouse mammary tumor provirus,Mtv44,on Chromosome 11" Mammalian Genome. 6. 472-473 (1995)
• [Publications] Baker,D.: "Genetic analysis of experimental allergic encephalomyelitis in mice" J.Immunol. 155. 4046-4051 (1995)
• [Publications] Kyuhei Tomonari: "Two Tcrb-V8.3 epitopes:one unique and the other shared by Tcrb-V8.2" Immunogenetics. (in press).
• [Publications] Kyuhei Tomonari: "Viral superantigens:an overview" CRC Press,Boca Raton(in press),
• [Publications] Fairchild,Susan.P.: "Viral superantigens:Endogenous and exogenous mouse mammary tumor viruses in various strains of inbred mice:complexity of the Mtv44 genome" CRC Press,Boca Raton(in press),
• [Publications] Rosenwasser,Oliver.A.: "Viral superantigens:Specificity of superantigens encoded by mouse mammary tumor viruses and their primary structures" CRC Press,Boca Raton(in press),
• [Publications] Kyuhei Tomonari: "Viral superantigens:Vβ5-and Vβ17a(cz)-specific superantigens encoded by mouse mammary tumor viruses:rules and exceptions in the specificity" CRC Press,Boca Raton(in press),
• [Publications] Kyuhei Tomonari: "Viral superantigens:The T Cell Receptor Vβ-Specific Positive Selection:importance of the CDR1 and/or CDR4 region" CRC Press,Boca Raton(in press),
• [Publications] Kyuhei Tomonari: "Viral superantigens:The T cell receptor Vβ repertoire in Japanese and possible involvement of viral superantigens in Behcet's disease" CRC Press,Boca Raton(in press),