ヒスタミンH_2受容体の遺伝子発現と分子機能発現の調節機構

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454259
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 菅野 健太郎 東京大学, 保健管理センター, 助教授 (60179116)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 福嶋 康之 東京大学, 医学部(病), 医員
• Keywords: ヒスタミン受容体 / 受容体機能調節 / 人工突然変異遺伝子

Research Abstract

本研究では、クローニングしたH2受容体遺伝子に人工的に点突然変異導入、あるいはTruncation導入など遺伝子操作技術を用いて変異遺伝子を作成し、これを遺伝子発現系に導入し、正常の遺伝子を発現したものと受容体機能、あるいは受容体細胞局在などを比較検討することによって、さまざまな受容体の機能発現に関わる問題を明らかにすることを試みるものである。
まず、われわれは3カ所の糖鎖結合コンセンサス部位の点突然変異遺伝子を作成し、これらをCHO細胞に発現させ、糖鎖修飾の影響を検討したところ、3カ所のいずれもが糖鎖による修飾を受けているわけではなく、このうちの2カ所が糖鎖によって修飾されていることを見いだした。また糖鎖による修飾はH2受容体のライガンド結合、cAMPやカルシウムといったセカンドメッセンジャー産生能あるいは受容体の細胞内局在などの受容体機能に大きな影響を与えないことが明らかにされた。この予備的研究成果についてはすでに邦文雑誌に論文として発表しているが、より完結した形で現在英文論文として投稿中である。
さらに、以前から我々が報告してきたH2受容体脱感作の機構として受容体キナーゼあるいはC-キナーゼの影響を検討するため、これらのキナーゼの燐酸化コンセンサス配列部位に変異導入を行い、現在その影響を詳細に検討している。これらのほかさらにいくつかの変異導入を試みており、今後興味ある知見が得られることものと思われる。

Research Products

• [Publications] Yasushi Fukushima,他: "Exprossion of histamine H_2 receptor in Chinese hamster ovary cells" J.Gastroenterology. 29 S VII. 68-72 (1994)
• [Publications] Naoki Hayashi,他: "Production of bioactive gastrin from the mou-eudocrire cell lines CHO and COS-7" FEBS Letters. 337. 27-32 (1994)
• [Publications] 菅野健太郎: "レセプターと臓器相関" Clinician. 431. 586-590 (1994)
• [Publications] 福嶋康之,他: "ヒスタミンH_2受容体の脱感作機構" Therapeutic Research. 15 S1. S189-S194 (1994)