肝細胞におけるビリルビン胆汁酸、その他の有機物質の輸送機序の解明

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454268
• Research Institution: Kinki University, Second Department of Internal Miedicine.
• Principal Investigator: 足立 幸彦 近畿大学, 医学部, 助教授 (50111026)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 南野 達夫 近畿大学, 医学部, 助教授 (40189220) ; 山本 俊夫 近畿大学, ライフサイエンス研究所, 教授 (50088522)
• Keywords: 有機アニオン / ビリルビン / プラバスタチン / タウロコール酸 / UDPグルクロン酸転移酵素 / 胆汁排泄 / Gilbert症候群 / Rotor症候群

Research Abstract

肝細胞の有機イオン代謝と輸送の機序を明らかとし、臨床医学との関連を追及する目的で、以下の研究を行った。(1)有機アニオンモデルとしてpravastatin(PS)を選び、その肝細胞から毛細胆管への排泄機序を明らかとする目的で、正常ラット及びDubin-Johnson症候群モデルの先天黄疸ラット(Eisai Hyperbilirubinuria rat;EHBR)の毛細胆管側肝細胞膜vesicle(CMV)への標識PS摂取を観察した。PSの輸送は、ATPと上行性pH勾配の両方により促進された。この輸送は、EHBRにおいては認められなかった。従って、この輸送がビリルビンその他の有機アニオン輸送に生理的に作用していると推定出来た。(2)ラットの胆管閉塞において、標識PV及び標識taurocholate(TC)のCMVへのATP依存性摂取の変化を経時的に観察した。胆管閉塞2日目で既にPV,TCの両者の摂取は著明に減少し、病態時のこれら膜輸送変化の意義が明らかとなった。(3)肝細胞小胞体のbilirubin UDP-glucuronosyl transferase (bilirubin UGT; UGT 1*1)活性が正常の約30%、約10%に減少している、各々Gilbert症候群、Grigler-Najjar症候群II型において、特に前者を中心にUGT1*1遺伝子の異常を解析した。Gilbert症候群においては、coding region の主にヘテロの点突然変異とpromoter region のホモのTA過剰を認めた。従って本症候群では、優性遺伝、劣性遺伝の両方が存在する可能性が高い。(4)Rotor症候群において、肝組織のglutathione S-transferase(GST)の免疫組織染色の欠如を認めた。従って、Rotor症候群は肝細胞上清分画のGSTの欠損が病因である可能性が強い。(5)我々の成績を中心として、bilirubinを含む有機アニオンの肝代謝・輸送について、文献的考察を加えた。

Research Products

• [Publications] 足立幸彦、他: "ATP-dependent transport of taurocholate in the canalicular membrane of rat hepatocytes requires magnesium." Med Sci Res. 23. 833-834 (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "Pravastatin transport across the hepatocyte canalicular membrane requires both ATP and transmembrane pH gradient." J Gastroenterol Hepatol. 11(印刷中). (1996)
• [Publications] 足立幸彦、他: "Analysis of genes for bilirubin UDP-glucuronosyltransferase in Gilbert's syndorome" Lancet. 345. 958-959 (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "Genetic inheritance of Gilbert's syndrome." Lancet. 346. 315- (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "Predicted mis-sense mutation in Gilbert's syndrome." Lancet. 346. 1494- (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "The genetic basis of Gilbert's syndrome." Lancet. 347. 557-558 (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "臨床DNA診断法(分担執筆)" 金原書店, 3 (1995)
• [Publications] 足立幸彦、他: "Color Atlas Liver Disease 臨床肝臓病" 日本メディカルセンター, 16 (1994)