運動ニューロン疾患における神経細胞質内封入体の生成機序の解明

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454277
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 水澤 英洋 筑波大学, 臨床医学系神経内科, 助教授 (30144091)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤田 恒夫 筑波大学, 臨床医学系神経内科, 講師 (30261803) ; 大越 教夫 筑波大学, 臨床医学系神経内科, 講師 (80203751) ; 永田 博司 茨城県立医療大学, 教授 (10198335)
• Keywords: 運動ニューロン / skein様封入体 / Lewy小体様 / round inclusion / ubiquitin / neurofilament / Cu / Zn SOD / NOS

Research Abstract

本年度は、運動ニューロン疾患におけるskein様封入体(SLI)、Lewy小体様ヒアリン封入体(LBHI)、Bunina小体について免疫細胞化学的、電顕的に検討した。また、孤発性運動ニューロン疾患におけるubiquitin化封入体をその形状からround inclusion(RI)としてLBHIから区別し、SLIおよびLBHIとの相互関係を明らかにすることを試みた。RIは、大部分が正円でなく、輪郭が毛羽立つなど不整であり、内部も小空胞があったり、腺維状になっていたりとかなり不均一であった。電顕的には、neurofilament、それよりやや太いフィラメント、顆粒状物質に加え、太いフィラメントの束が認められた。後者はSLIにみられるフィラメントの束とは区別できず、逆に集簇したSLIではフィラメント束の間隙にRIのものとよく似たフリーのフィラメントや顆粒状物質が存在しており、両者は密接に関係しているものと思われた。免疫細胞化学でも、RIは、neurofilament、Cu/Zu superoxide dismutase(SOD)、ubiquitin Cterminal hydrolaseのいずれも陰性のことが多く、これらが陽性のLBHIとは異なり、SLIと同様の反応を示した。すなわち、RIは“round"な形のSLIそのものである可能性が明らかとなった〔11th TMIN International Symposium:Amyotrophic Lateral Sclerosis(Tokyo,October 1995),ibid.,Elsevier,in press〕。この過程で、RIは従来neurofilament陰性であるとされてきたが、一部には電顕的、免疫細胞化学的にneurofilamentが存在することを明らかにした(ibid.,in preparation)。LBHIがCu/ZuSOD陽性であることから、Parkinson病における真のLewy小体について免疫細胞化学的検索を行い、脳乾型および皮質型Lewy小体は大部分はCu/ZnSOD陰性であるものの、一部は陽性であることを明らかにした〔第36回日本神経学会(名古屋)、4th IBRO World Congress of Neuroscience(Kyoto)〕。さらに、運動ニューロン疾患において、上位運動ニューロンの変性にnitrotyrosineすなわちNOを介する酸化ストレスが関与していることを明らかにした〔11th TMIN International Symposium:Amyotrophic Lateral Sclerosis(Tokyo,October 1995),ibid.,Elsevier,in press〕。関連する研究として、Alzheimer病の分子遺伝学、脊髄小脳変性症の蓄積物質、ミトコンドリア脳筋症などの研究でも進展がみられた。

Research Products

• [Publications] 水澤 英洋: "ユビキチン化封入体." 神経進歩. 40. 5-15 (1996)
• [Publications] Mizusawa H et al: "Cu/Zn SOD immunoreactivity in Lewy body of Parkinson's disease and Lewy body-like inclusion of familial amyotrophic lateral sclerosis." IVth IBRO world congress of neuroscience. 508 (1994)
• [Publications] Okuizumi k et al: "Genetic association of the very low density lipoprotein (VLDL) receptor gene with sporadic Alzheimer's disease." Nature Genetics. 11. 207-209 (1995)
• [Publications] Ishikawa k et al: "Calbindin-D 28k immunoreactivity in the cerebellum of spinocerebellar degeneration." J Neurol Sci. 129. 179-185 (1995)
• [Publications] Tamaoka A et al: "Ubiquitinated αB-crystallin in glial cytoplasmic inclusions from the brain of a patient with multipe system atrophy." J Neurol Sci. 129. 192-198 (1995)
• [Publications] Ohkoshi N et al: "Superoxide dismutases of muscle in mitochondrial encephalonyopathy." Muscle Nerve. 18. 1265-1271 (1995)
• [Publications] Mizusawa H et al(分担): "XIth TMIN International symposium,Amyotrophic lateral sclerosis-Progress and perspectives in basic research and clinical application." Elsevier Science(in press),
• [Publications] Fujita T et al(分担): "XIth TMIN International symposium,Amyotrophic lateral sclerosis-Progress and perspectives in basic research and clinical application." Elsevier Science(in press),