1994 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞NO合成酵素の調節機構とその病態的意義

Research Project

Project/Area Number	06454292
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	横山光宏神戸大学, 医学部, 教授 (40135794)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	末松正邦神戸大学, 医学部・付属病院, 助手 (90240853) 川嶋成乃亮神戸大学, 医学部, 助手 (10177678) 川原康洋神戸大学, 医学部・付属病院, 講師 (80169755)
Keywords	血管内皮細胞 / 内皮由来血管弛緩因子 / 低比重リボ蛋白質 / 高比重リボ蛋白質 / NO合成酵素 / プロテインキナーゼC / リゾホスファチジツコリン / 細胞内Ca^2濃度
Research Abstract	本研究は血管内皮細胞NO合成酵素(cNOS)のタンパク質、遺伝子レベルでの調節機構について検討した。 1.内皮細胞NO合成酵素のリン酸化による活性調節機構ウシ大動脈培養内皮細胞よりNOSを精製し、protein kinase C(PKC)およびcAMP dependent protein kinase(PKA)によるリン酸化について検討した。NOSはPKCおよびPKAによってリン酸化された。NOSはPKCによってその活性が抑制されたが、PKAには影響されなかった。 2.内皮細胞NO合成酵素のミリスチン酸による翻訳後修飾の意義我々は,変異cNOS遺伝子をCOS-7細胞に遺伝子導入し,血管内皮細胞cNOSのミリスチン酸による翻訳後修飾の意義について検討した.内皮細胞cNOSは細胞膜分画に存在したがミリスチン酸のないmutantNOSは細胞質分画へ移行した。細胞外へのNO放出量はwild type NOSが変異NOSに比べて高値を示した。以上より、内皮細胞のNOSは細胞膜に存在し、NOを効率よく細胞外に放出することが明らかとなった。 3.内皮細胞NOSmRNAの脂質、動脈硬化による発現調節機構ウシ大動脈培養内皮細胞を用いてNOSmRNAの発現調節機構を検討した。インターフェロンα/βはNOSmRNAを転写レベルで亢進させ、一方、TNF-αはcNOSmRNAを不安定化させ、cNOSmRNAを減少させた。また、動脈硬化の発症に重要な酸化LDLはcNOSmRNA発現を増加させたが、LDLおよびHDLはcNOS発現に影響しなかった。さらに、酸化LDL中に増加するリゾフォスファチジルコリン(LPC)はcNOSmRNA発現を2.6倍に増加させた。したがって、動脈硬化巣で増加する酸化LDLやLPCなどの脂質がcNOSの遺伝子レベルでその発現の制御に重要な役割をはたしていると考えられた。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Ichiro Nakayama: "Angiotensin II Inhibits Cytokine-stimulated Inducible Nitric Oxide Synthase Expression in Vascular Smooth Muscle Cells" The Journal of Biological Chemistry. 269. 11628-11633 (1994)
[Publications] Nobutaka Inoue: "Palmitoyl-L-carnitine modifies the function of vascular endothelium." Cardiovascular Research. 71. 1410-1421 (1994)
[Publications] Yoichi Miwa: "Augmented receptor-mediated Ca2_+mobilization causes supersensitivity of contractile response to serotonin in atherosclerotic artery." Circulation Research. 75. 1096-1102 (1994)
[Publications] Ken-ichi Hirata: "Activation and inhibition of nitric oxide synthase purified from cultured bovine aoitic endothelial cells by phospholipids and arachidonic acids." Annals of the New York Academy of Sciences. 748. 555-558 (1995)
[Publications] Ken-ichi Hirata: "Inhibition of Endothelial Nitric Oxide Synthase Activity by protein Kinase C" Hypertension. 25. 180-185 (1995)
[Publications] Ken-ichi Hirata: "Low Concentration of Oxidized Low Density Lipoprotein and Lysophosphatidylcholine Upregulate Constitutive Nitric Oxide Synthase mRNA" Circulation Research. (in press). (1995)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞NO合成酵素の調節機構とその病態的意義

Principal Investigator

横山 光宏 神戸大学, 医学部, 教授 (40135794)

Research Products

[Publications] Ichiro Nakayama: "Angiotensin II Inhibits Cytokine-stimulated Inducible Nitric Oxide Synthase Expression in Vascular Smooth Muscle Cells" The Journal of Biological Chemistry. 269. 11628-11633 (1994)

[Publications] Nobutaka Inoue: "Palmitoyl-L-carnitine modifies the function of vascular endothelium." Cardiovascular Research. 71. 1410-1421 (1994)

[Publications] Yoichi Miwa: "Augmented receptor-mediated Ca2_+mobilization causes supersensitivity of contractile response to serotonin in atherosclerotic artery." Circulation Research. 75. 1096-1102 (1994)

[Publications] Ken-ichi Hirata: "Activation and inhibition of nitric oxide synthase purified from cultured bovine aoitic endothelial cells by phospholipids and arachidonic acids." Annals of the New York Academy of Sciences. 748. 555-558 (1995)

[Publications] Ken-ichi Hirata: "Inhibition of Endothelial Nitric Oxide Synthase Activity by protein Kinase C" Hypertension. 25. 180-185 (1995)

[Publications] Ken-ichi Hirata: "Low Concentration of Oxidized Low Density Lipoprotein and Lysophosphatidylcholine Upregulate Constitutive Nitric Oxide Synthase mRNA" Circulation Research. (in press). (1995)

横山光宏神戸大学, 医学部, 教授 (40135794)