腺癌における糖転移酵素の発現機序に関する研究-子宮体癌,卵巣癌を対象として-

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454479
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 野澤 志朗 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051557)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 久布白 兼行 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50170022) ; 青木 大輔 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (30167788) ; 塚崎 克己 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (40118972)
• Keywords: フコース転移酵素 / ガラクトース転移酵素

Research Abstract

我々は、SNG-S細胞とSNG-W細胞におけるα1-2FT、α1-3FT、α1-4FT活性を測定し、α1-2FTとα1-3FT活性では両細胞間で明らかな差異を認めないものの、SNG-S細胞はSNG-W細胞に比べてα1-4FTの酵素活性が亢進していることを明らかにしてきた。そこで、α1-4FTをコードするFT-III遺伝子の解析を行った。SNG-S、SNG-W細胞よりDMAを抽出しα1-4FTの特異的な遺伝子配列部分を含む領域をプローブとしてサザン・ブロットを施行したところ、遺伝子再構成や、遺伝子増幅は認められず、両者の細胞間における酵素活性の差は遺伝子発現の段階で調節されることが明らかになった。また、FT-IIIのcDNAをプローブとしてノザン・ブロット法を行ったところ、SNG-S細胞はSNG-W細胞に比べてFT-IIIの遺伝子発現が強く認められることから、この遺伝子の発現の差は遺伝子の発現をコントロールするプロモーター領域により調節をうけている可能性が示唆された。
さらにβ1,4-galactosyltransferase(GalT)のうち卵巣癌患者の腹水由来のGalTには、native-PAGE上、通常の血清中には見られない移動度の遅いバンドが含まれていることが判明している。この分画を癌関連ガラクトース移転酵素(galactosyltransferase associated with tumor;GAT)と呼び、GATだけを特異的に捕捉するモノクローナル抗体MAb8513ならびにGalTとGATの両者を認識するMAb8628によるdouble-determinant EIAによる血清中GATの測定によればGATは卵巣癌患者できわめて特異的に上昇する。そこで、癌細胞におけるGATの特異的な放出機序解明のために、各種培養細胞を用いて培養上清中のGAT及び総GalT活性を測定するとともにMAb8628とMAb8513を用いて免疫組織化学的染色を行ったところ、MAb8628反応は核周囲の網状構造に陽性で検索した細胞間では大きな差異は認められなかったが、MAb8513の陽性部位は細胞質内に顆粒状に認められ、培養上清中のGAT値が高い細胞ではその反応強度は弱くなる傾向を示した。したがって、正常細胞からGalTが可溶型となって放出される場合には、MAb8513によって認識されるGAT蛋白分子の一部が細胞内に残存している可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] 塚崎 克己: "抗子宮体癌モノクローナル抗体MSN-1の特性とその臨床応用への試み" 癌と化学療法. 21. 141-149 (1994)
• [Publications] 野澤 志朗: "卵巣癌の新しい腫瘍マーカー,癌関連ガラクトース転移酵素(GAT)の臨床的意義-卵巣癌と内膜症性嚢胞との鑑別におけるGATの有用性について-" 癌と化学療法. 21. 507-516 (1994)
• [Publications] 野澤 志朗: "卵巣癌の新しい腫瘍マーカーCA(54)/(61)およびCA602の基礎的,臨床的有用性の検討-(第3報)各種良性疾患および悪性疾患患者血清の測定結果-" 癌と化学療法. 21. 823-832 (1994)
• [Publications] 久布白 兼行: "子宮体癌における複合糖質の発現異常とその浸潤・転移に及ぼす影響" 臨床婦人科産科. 49. 225-239 (1995)
• [Publications] Kaneyuki Kubushiro: "Expression mechanism of human uterine endometrial cancer-specific fucosylated carbohydrate chains:aberrant α 1→4 fucosyltransferase in uterine endometrial cancer-derived cell lines with type l carbohydrate chain." International Journal of Oncology. 6. 93-97 (1995)
• [Publications] 久布白 兼行: "子宮体癌におけるMSN-1認識抗原の組織接着,ならびに転移に与える影響" 日本産科婦人科学会雑誌. 47. 163-164 (1995)