早期発症型歯周炎における多形核白血球の分子・遺伝子解析

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454536
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 吉江 弘正 新潟大学, 歯学部, 助教授 (20143787)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 野村 隆 新潟大学, 歯学部附属病院, 助手 (70251840) ; 松木 裕 新潟大学, 歯学部, 助手 (70242435)
• Keywords: 早期発症型歯周炎 / 多形核白血球 / Fcγレセプター / 補体レセプター / 貪食能 / mRNA / 歯肉溝滲出液

Research Abstract

本研究(I)では、歯周炎患者の歯肉溝滲出液(GCF)中および末梢血(PB)の多形核白血球(PMN)のIgGを介した貪食能とFcγレセプターIII,II(FcγRIII,FcγRII)の発現をフローサイトメーターにて解析し、更に、両レセプターのmRNAレベルでの発現をRT-PCR法にて解析し、膜表面発現への関与を総合的に検討した。GCF-PMNにおけるIgGを介した貪食能およびFcγRIII,FcγRII発現強度は、PB-PMNに比べて有意に減少していることが明かとなった。また、GCF-PMNの貪食能の低下にFcγRIII,II分子の発現低下が関与していた。さらに、GCF-PMNのFcγRIIImRNAの発現がPB-PMNに比べ有意な減少を示したことより、FcγRIII分子の発現低下には、PMNがGCF中に滲出してくる過程で細胞膜表面からレセプターが遊離され、mRNAの発現レベルでの減少も関与することが示唆された。
本研究(II)では、GCF中のPMN補体レセプター(CR1,CR3)の転写レベルについて末梢血のものと比較しながらRT-PCRおよびin situ hybridization法にて解析した。全例においてCR1,CR3ともに、GCF-PMNはPB-PMNよりも有意に低いmRNAレベルを示した。in situ hybridizationにおいては、CR1,CR3ともにアンチセンスプローブと反応されたPB-PMNは大部分が陽性のシグナルを示したのに対して、GCF-PMNでは陽性のシグナルが少数の細胞に限られていた。以上より、GCF-PMNのCR1,CR3 mRNAレベルはPBに比較して有意に低下していることが明らかになった。したがって、GCF-PMNの細胞表面に増加している補体レセプターは、あらかじめタンパク質として貯蔵された補体レセプターが細胞表面に輸送されるのみであることが示唆された。

Research Products

• [Publications] A.Miyazaki,T.Kobayashi,T.Suzuki,H.Yoshie,K.Hara: ""Loss of Fcg receptor and impaired phagocytosis of polymorphonuclear luekocytes in gingival crevicular fluid."" Journal of Periodontal Research. (in press). (1996)
• [Publications] N.Sugita,Y.Matsuki,H.Yoshie,K.Hara: ""Characterization of CR1 and CR3 mRNA expressions on polymorphonuclear luekocytes in gingival crevicular fluid from periodontitis-affected patients."" Archives of Oral Biology. (in press). (1996)
• [Publications] H.Yoshie.: ""Characteristics of immuno competent cells in gingival crevicular fluid in periodontitis patients."" Japanese Journal of Inflammation. (in press). (1996)