発癌遺伝子と癌抑制遺伝子産物による組織適合性抗原クラスI遺伝子の発現調節

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06454604
• Research Institution: The Institute of Physical and Chemical Research
• Principal Investigator: 横山 一成 理化学研究所, ジーンバンク室, 副主任研究員 (80182707)
• Keywords: アデノフィルス / MHCクラスI / E1A / TBP / 負の転写調節 / P300 / ドメイン解析

Research Abstract

アデノウィルス12型E1AよるMHCクラスI遺伝子の発現制御に関与するCAAリピートエレメント結合因子H-2 NRP-1, H-2 NRP-2をコードする遺伝子を単離同定した。DNA結合活性はHGMドメイン及び塩基性のアミノ酸に、転写制御活性はそれよりアミノ末端の領域に帰属することを明らかにした。一方、TATA様エレメントにはTBP結合因子が結合する。更に12型EIAの13SmRNA, 12SmRNAそして5型EIAの13SmRNAの各翻訳物を使用し、TBPとの結合反応を解析した。その結果、TBPは12型E1A 13SmRNA蛋白とCRドメインで結合し、しかもその結合能は、12型E1A13SmRNA蛋白が、12型E1A12SmRNA蛋白、5型E1A13SmRNA蛋白よりも約10倍強い。また、H-2 NRP-1は、E1AのCR1ドメインに結合し、その結合能も12型E1A13SmRNA蛋白、特異的である。グリセロール遠心による結合能の解析から12型E1A13SmRNA蛋白はTBPとH-2NR P-1両者に強固に結合し、高分子量の複合体を形成する。更にTBPは癌抑制遺伝子産物P300と結合することも明らかとなった。P300の役割を知るためにリボザイム法による転写産物のノックアウト実験を行ない、現在in vitroで満足のいく結果を得ている。更にin vivoでもその作用を発揮していることも明らかになり、現在その分子機構を明らかにしつつある。各因子をコードする遺伝子群をアデノウィルスベクターに挿入し再構成系を構築中である。

Research Products

• [Publications] Katagiri, K., Yokoyama, K. Katagiri, T.: "Lyn and Fgr Prevent apoptosis during retinoic acid-induced granulocytic differentiation" J. Biol. Chemi.(印刷中). (1996)
• [Publications] Nemoto, T. Yokoyama, K.: "Mechanism of dimer formation of the 90-kDa heat-shock protein" Eur. J. Biochem.233. 1-8 (1995)
• [Publications] Hydoer, S. M, Yokoyama. K. Stancel, G. M.: "The protooncogene c-jun contains an unusual estrogen--inducible enhance within the coding sequences" J. Biol. Chem.270. 8506-8513 (1995)
• [Publications] Tang, X., Yokoyama, K.: "Cooperativity between an upstream TATA-like sequence and a CAA repeated elements mediates E1A-dependent negative repression of H-2k^b class I gene" J. Biol. Chem.270. 2327-2336 (1995)
• [Publications] Kitabayashi, I Yokoyama. K.: "Phosphorylation of adenovirus E1A associated 300-kDa protein in response to retinoic acid and E1A during the differentiation of F9 cells" EMBO. J.14. 3496-3509 (1995)
• [Publications] Li, H-O., Yokoyama. K.: "Induction of adenovirus-5 E1A of the differentiation phenotype of F9 teratocarcinoma cells involves a concerved region (CR1)of E1A" Biochim. Biophys. Acta.1266. 148-156 (1995)
• [Publications] 李 海鴎、横山一成: "臨床科学" アデノウィルスE1A遺伝子産物による転写調節, 1044-1049 (1995)
• [Publications] 横山一成、小沢ふじ子: "免疫と生体防御" HLA抗原遺伝子の解析, 576-592 (1995)