1994 Fiscal Year Annual Research Report
糸状菌による機能性Single Cell Oilの生産とその応用
| Project/Area Number |
06556016
|
|---|
| Research Institution | Kyoto University |
|---|
Principal Investigator |
清水 昌 京都大学, 農学部, 教授 (70093250)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
片岡 道彦 京都大学, 農学部, 助手 (90252494)
小林 達彦 京都大学, 農学部, 講師 (70221976)
秋元 健吾 サントリー(株), 生物医学研究所, 主任研究員
馬場 直道 岡山大学, 農学部, 教授 (50027075)
|
|---|
| Keywords | アラキドン酸 / ミ-ド酸 / ジホモ-γ-リノレン酸 / 高度不飽和脂肪酸 / 機能性油脂 / Single Cell Oil / Moritierella alpina |
|---|
| Research Abstract |
(1)PUFA生産菌の改良とPUFA含有油脂の生産条件の設定(清水、秋元、片岡、小林)
アラキドン酸高生産菌M.alpina 1S-4の胞子を変異処理し、本菌に存在すると考えられている全ての不飽和化酸素(Δ5,Δ6,Δ12,Δ9,ω3(Δ15))に対応する欠損変異株を既に得ている。これらの変異株の脂肪酸組成は、親株とは著しく異なり、以下のPUFA含有油脂の生産に利用できると考えている。収量増大と大量生産のための条件設定を検討し、目的とする脂肪酸の生産量を3-10g/1程度に引き上げることに成功した。
ω6系PUFA含有油脂:主に親株を用いアラキドン酸生産を効率化するファクターを検討し、培養の高密度化と培養時間の短縮をはかることで、実用的な生産量(5-10g/1/5days、アラキドン酸含有量30-60%)を達成した。特に、溶存酸素の枯渇がPUFA含量の低下をもたらすことを認め、通気攪拌方式の改良、空気-酵素混合気の通気などが効果的であった。これによって得られた成果をΔ5不飽和化酵素欠損変異株(S1)の培養に適用し、ジホモ-γ-リノレン酸高含有油脂の生産も可能となった。
ω9系PUFA含有油脂:Δ12不飽和化酵素欠損変異株(Mut48)はオレイン酸(18:1ω9)からリノール酸への変換が出来ず、オレイン酸を著量蓄積する。培養時間を長くすると、蓄積したオリイン酸はω9経路へ流れ、最終的にはミ-ド酸へ変換されることを認めた。よって、ω9PUFAのみで構成される新規な油脂の生産が可能となった。(生産量約3.5g11)
(2)機能性リン脂質及び過酸化リン脂質の立体選択的合成と生成物の生化学的評価(馬場、清水、秋元)
リノレン酸のエステルを出発基質としてリパーゼによるアシル化反応とリポキシゲナーゼによる過酸化反応をキ-ステップとする合成法を開発している。アラキドン酸、ミ-ド酸、ジホモ-γ-リノレン酸を中心に同様のリン脂質類の合成が可能なことを示した。
|
-
[Publications] 清水昌: "微生物ペルオキシダーゼの機能解析とその利用" 農化誌. 68. 1689-1692 (1994)
-
[Publications] 清水昌: "「スクリーニング」にまつわるあいまいな話" バイオサイエンスとインダストリー. 52. 134 (1994)
-
[Publications] Kobayashi,M.etal.: "Versatile nitrilases:Nitrile-hydrolyzing enzymes" FEMS Microbiol.Lett.120. 217-224 (1994)
-
[Publications] Kobayashi,M.et al.: "Occurrence of novel enzymes involved in biosynthesis of indole-3-acetic acid from indole-3-acetonitrile in plant-associated bacteria" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 92. 714-718 (1995)
-
[Publications] Kataoka,M.et al.: "Optical resolution of racemic pantoyl lactone with lactonohydrolase" Appl.Microbiol.Biotechnol.in press. (1995)
-
[Publications] Ogawa,J.et al.: "beta-Ureidopropionase from N-carbamoyl-L-amino acid amidohydrolase" Eur.J.Biochem.223. 625-630 (1994)
