1994 Fiscal Year Annual Research Report
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06557102
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
村山 洋二 岡山大学, 歯学部, 教授 (50029972)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮本 学 岡山大学, 歯学部, 助手 (40252978)
新井 英雄 岡山大学, 歯学部, 助手 (70222718)
磯島 修 岡山大学, 歯学部附属病院, 講師 (90176256)
永井 淳 岡山大学, 歯学部附属病院, 講師 (70252989)
栗原 英見 岡山大学, 歯学部, 助教授 (40161765)
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| Keywords | 歯周病 / 歯周病原性細菌 / リボゾームRNA / 細菌検査 |
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| Research Abstract |
歯科臨床、特に歯周病治療に利用可能な細菌検査システムの開発のため、平成6年度は以下のように、特に細菌検出法の手技について各種検討を加えた。
1.歯周病原性細菌特異的なDNAプローブの開発
16SリボゾームRNAの共通配列に対応するオリゴヌクレオチドをプライマーとして利用するPCR法と、その産物をダイレクトシークエンス法による塩基配列の解読を行うことにより、培地に生育した細菌菌体を出発材料として、短時間で16SリボゾームRNAの配列を解読する方法を樹立した。
2.特異的歯周病細菌の高感度検出法の開発
細菌菌体からPCR法により16SリボゾームRNAを増幅し、さらにそのPCR産物を16SリボゾームRNAの特異的配列に対応するオリゴヌクレオチドプローブを用いてハイブリダイゼーション法により特異的細菌を検出する高感度検出法を開発した、この手法を用いれば、約10個の標的細菌を検出できた。本法は高感度であるが、多数の細菌菌体が検体に含まれている場合、偽陽性の結果が出やすい欠点があった。
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