1994 Fiscal Year Annual Research Report
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06558096
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
徳田 元 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (40125943)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松山 伸一 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (50183108)
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| Keywords | 分泌型蛋白質 / 蛋白質分泌装置 / 酸性リン脂質 / Sec因子大量発現 |
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| Research Abstract |
大腸菌における分泌型蛋白質の膜透過には、これまでに7種のSec因子(A,B,D,E,F,G,Y)が関与していることが明らかになっている。本研究はこれら因子の同時大量発現により分泌効率の向上を目指して行ったものであり、以下の点を明らかにした。
1.SecGの大量発現系を構築した。
2.反転膜小胞系においてin vitro膜透過速度の向上に因子の大量発現がどう影響するかを調べた。その結果、SecY,SecEのみの大量発現では活性上昇は数倍に過ぎないが、SecGもさらに大量発現すると数十倍活性を促進することが分かった。
3. 種以外に未知の因子が存在するかどうかを調べた。その結果、SecG遺伝子破壊株において分泌活性を上昇させる遺伝子を見出した。またこの遺伝子の塩基配列を明らかにした。
4.酸性リン脂質合成酵素を大量発現すると、低温での分泌効率が上昇することを見出した。
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[Publications] Tokuda,Hajime: "Biochemical characterization of the presecretory protein translocation machinery of Escherichia coli." FEBS Lett.346. 65-68 (1994)
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[Publications] Nishiyama,Ken-ichi: "Disruption of the gene encoding p12(SecG)reveals the direct involvement and important function of SecG in the protein translocation of Escherichia coli at low temperature." EMBO J.13. 3272-3277 (1994)
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[Publications] Douville,K.: "Band 1 subunit of Escherichia coli preprotein translocase and integral membrane export factor p12 are the same protein.(Communication)" J.Biol.Chem.269. 18705-18707 (1994)
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[Publications] Hanada,Mitsuharu: "Reconstitution of an efficient protein translocation machinery comprising SecA and the three membrane proteins,SecY,SecE,and SecG(p12)." J.Biol.Chem.269. 23625-23631 (1994)
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[Publications] 徳田 元: "大腸菌の蛋白質膜透過系とリポ蛋白質外膜局在化のメカニズム" 日本農芸化学会誌. 69. 39-42 (1995)
