1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト味覚レセプターの構造の解析と発現糸の設計に関する分子生物的研究

Research Project

Project/Area Number	06660150
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	荒井綜一東京大学, 農学部, 教授 (20011934)
Keywords	味覚 / レセプター / 分子生物学
Research Abstract	種々の味は物質が舌の上皮に何らかの作用を及ぼすことによって感じられる。基本味のうちいくつか(甘味と苦味)は味覚細胞内のセカンドメッセイイジャーの濃度を上昇させることにより、それらの味の受容にはGタンパク質と共役している七回膜貫通型のレセプターの関与が示唆される。我々は既にラットにおいて、舌の上皮に発現する七回膜貫通型のレセプターの存在ならびに構造を明らかとしており、そのレセプターが味覚に関与するものであるとの報告を行っている。本研究においてはそれらの知見をもとに、ヒトにおいて同様のレセプターを発見し、その味覚への関与の機構について明らかとすることを目的に実施された。まずヒトの舌上皮の味蕾をよりmRNAを調製し、cDNAを合成した。これをテンプレートとしてPCRを行った。プライマーにはラットの味覚レセプターであるGUST27由来のもの、視覚のレセプターであるオプシン由来のもの、Gタンパク質共役型レセプターに共通のコンセンサスシークエンス由来のもの等多数のものを用いた。そうしたところフラグメントが増幅されたものがいくつかあり、それらの塩基配列を決定した。得られたフラグメントの塩基配列から推定されるアミノ酸配列中にはGタンパク質共役型レセプターに見られる疎水性あみの酸からなる膜貫通領域と推定される部分が存在したことから、これらのものがGタンパク質共役型レセプターのフラグメントであると決定した。in situハイブリダイゼーションの結果より、これらが味蕾を中心とした舌上皮に発現していることが判明し、このことより味覚に関与するレセプターであると期待される。現在このクローンの全長を得るべく、PCRを用いて検討を行っており、良好な結果が得られつつある。全長のクローンが得られ次第、バキュロウィルスを用いた発現系を用いてレセプターの機能を明らかにしていく予定である。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Abe et al.: "Primary structure and cell-type specific expression of a gustatory G porptein-coupled receptor related to olfactory receptors." J.Biol.Chem.268. 12033-12039 (1993)
[Publications] Y.Michigami et al.: "Cloning and sequencing of an ice nucleation active gene of Erwinia uredvora" Biosci.Biotech.Biochem.58. 762-764 (1994)
[Publications] H.Hosoyama et al.: "Oryzacystatin exogenously introduced into protoplasts and regeneration of a transgenic rice." Biosci.Biotech.Biochem.58. 1500-1506 (1994)
[Publications] N.Kishimoto et al.: "Identification of duplicated segments in rice chromosomes 1 and 5 by lincage analysis of cDNA makers of known functions." Theor Appl.Genet.88. 722-726 (1994)
[Publications] M.Abe et al.: "Corn cystatin I expressed in Escherichia coli Investigation of its inhibitory profile and occurrence in corn kernels." J.Biochem.116. 488-492 (1994)
[Publications] I.Matsumoto et al.: "A putative digestive cysteine proteinase of an insect,Drosophila melanogaster,predominantly expressed in embryonic and larval midgut." Eur.J.Biochem.227. 582-587 (1995)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト味覚レセプターの構造の解析と発現糸の設計に関する分子生物的研究

Principal Investigator

荒井 綜一 東京大学, 農学部, 教授 (20011934)

Research Products

[Publications] K.Abe et al.: "Primary structure and cell-type specific expression of a gustatory G porptein-coupled receptor related to olfactory receptors." J.Biol.Chem.268. 12033-12039 (1993)

[Publications] Y.Michigami et al.: "Cloning and sequencing of an ice nucleation active gene of Erwinia uredvora" Biosci.Biotech.Biochem.58. 762-764 (1994)

[Publications] H.Hosoyama et al.: "Oryzacystatin exogenously introduced into protoplasts and regeneration of a transgenic rice." Biosci.Biotech.Biochem.58. 1500-1506 (1994)

[Publications] N.Kishimoto et al.: "Identification of duplicated segments in rice chromosomes 1 and 5 by lincage analysis of cDNA makers of known functions." Theor Appl.Genet.88. 722-726 (1994)

[Publications] M.Abe et al.: "Corn cystatin I expressed in Escherichia coli Investigation of its inhibitory profile and occurrence in corn kernels." J.Biochem.116. 488-492 (1994)

[Publications] I.Matsumoto et al.: "A putative digestive cysteine proteinase of an insect,Drosophila melanogaster,predominantly expressed in embryonic and larval midgut." Eur.J.Biochem.227. 582-587 (1995)

荒井綜一東京大学, 農学部, 教授 (20011934)