1994 Fiscal Year Annual Research Report
脂肪酸ω3/ω6バランスが食細胞のプロスタグランジン代謝調節に及ぼす効果について
Project/Area Number |
06660170
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Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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Research Institution | 国立予防衛生研究所 |
Principal Investigator |
田中 康仁 国立予防衛生研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (30113484)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
天野 富美夫 国立予防衛生研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (90142132)
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Keywords | マクロファージ / 脂肪酸 / アラキドン酸 / エイコサペンタエン酸 / プロスタグランジン / プロスタグランジンエンドパンオキサイド合成酵素 / リポ多糖 / ガンマーリノレン酸 |
Research Abstract |
1.マクロファージ系細胞株RAW264.7を用いて脂肪酸とBSAの複合体による細胞修飾法、GCとGC-MSによる脂肪酸定量法を確立した。ω3脂肪酸のEPAまたはαリノレン酸(αLA)修飾細胞では用いた脂肪酸とその代謝産物のDPAまたはEPAの増加が検出された。他方、ω6脂肪酸であるγリノレン酸(γLA)修飾細胞ではγLAの増加はわずかで、ジホモγリノレン酸やアラキドン酸(AA)の増加が認められた。AA修飾ではAAのみが増加した。2.プロスタグランジン(PG)H合成酵素(PGHS)活性測定法を確立し各種脂肪酸の効果を調べた。飽和脂肪酸及びオレイン酸は酵素活性に影響を与えなかったが、AA及びEPAはこの酵素活性を強く阻害した。この阻害は基質[^<14>C]AAに対する拮抗阻害として説明できる。一方、酵素反応の基質とはならないリノール酸、αLAあるいはγLAも高濃度ではPGHS活性を阻害した。3.EPAを基質とするPGHS活性を測定したところ、AAに比べ1/5程度しか反応しなかった。4.脂肪酸修飾した細胞のPGHS比活性について調べたところ、脂肪酸修飾のみではPGHS比活性はほとんど変化していなかった。5.この細胞ではLPS刺激によりPGHS比活性の上昇とPG遊離促進が観察される。ウエスタンブロット法により誘導型のPGHS-2がLPS刺激により増加していることが確認され、この酵素の誘導がPG遊離の調節に重要であることが示唆された。6.EPA修飾細胞ではLPS刺激によるPGHS比活性の上昇は認められず、また、AA修飾細胞をLPS刺激すると、PGHS比活性は著しく低下した。しかしながら、ウエスタンブロット法の結果はPGHS-2の誘導が未修飾細胞と同様かそれ以上であることを示唆しており、マクロファージのPG遊離に新たな因子の関与も考えられる。この点について更に解析を進めたい。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] 田中 康仁: "LPSによるRAW264.7マクロファージ細胞のプロスタグランジン合成系活性賦活化と各種ステロイド系拡炎症剤の効果" 日本薬学会第115年会 講演要旨集. 3. 148 (1995)
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[Publications] 天野 富美夫: "マクロファージ系細胞株RAW264.7のLPS誘導アラキドン酸遊離の調節機構の解析" 生化学. 66(7). 1071 (1994)