1994 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
06660249
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Research Institution | Fukui Prefectural University |
Principal Investigator |
西田 睦 福井県立大学, 生物資源学部, 助教授 (90136896)
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Keywords | アユ / DNA / PCR / 塩基配列 |
Research Abstract |
1.有用なDNA標識は、個体変異の多い部位に設定できる。今回まず対象としたミトコンドリアDNAにおいては、多くの脊椎動物では、Dループ領域を含むコントロール領域で最も個体変異が多い。そこで、この部位を対象にして、新たに設計、作成したものを含むいくつものプライマーの組み合せを用い、PCR法によってその増幅を試みた。その結果、コントロール領域全域が容易に増幅できる、いくつかのプライマーセットを開発した。 2.また、通常のフェノール法以外に、より簡便なDNA試料の抽出法を検討し、イオン交換樹脂を利用した簡便な抽出法による試料からも、十分量のDNAが増幅できることを確認した。これは、多くの個体を対象とする今後の調査のために有用なDNA試料抽出法となる可能性がある。 3.さらに、非対象プライマーによる直接塩基配列決定法に加えて、放射性同位元素を用いずに、2本鎖DNAを試料にDNAシーケンサーと蛍光標識を利用して塩基配列を決定する方法を種々検討し、効率的な実験システムを確立した。 4.以上の成果を基礎して、両側回遊型アユの数個体につき、ミトコンドリアDNAのコントロール領域のほぼ全域の塩基配列を決定した。引き続き、琵琶湖産アユ、およびリュウキュウアユ集団の複数個体について、同領域の塩基配列決定を進めている。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Sawashi,Y.and M.Nishida: "Genetic differentiation in populations of the Pyukyu-ayu Plecoglossus altivelis ryukyuensis in Amami-oshima Island." Japanese Journal of Ichthyology. 41. 253-260 (1994)
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[Publications] Katoh,M.and M.Nishida: "Biochemical and egg size evolution of freshwater fishes in the Rhinogobius brunneus complex (Pisces,Gobiidae) in Okinawa,Japan." Biological Journal of Linnean Society. 51. 325-335 (1994)
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[Publications] 西田 睦: "河川陸封型種分化は特殊か?" 東京大学海洋研究所大槌臨海研究センター報告. (19). 10-11 (1994)
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[Publications] 後藤 晃ら(編): "川と海を回遊する淡水魚-生活史と進化" 東海大学出版会, 279 (1994)
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[Publications] 池原貞雄ら(編): "琉球の清流" 沖縄出版, 229 (1994)