超音波断層像および羊水中浮遊細胞DNAのPCR法による牛胎子の性判別

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06660404
• Research Institution: KAGOSHIMA UNIVERSITY
• Principal Investigator: 上村 俊一 鹿児島大学, 農学部, 助教授 (90233949)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浜名 克巳 鹿児島大学, 農学部, 教授 (30011977)
• Keywords: 性判別 / ウシ / 生殖結節 / 超音波診断 / PCR法

Research Abstract

超音波断層装置を利用した新しい診断技術として、妊娠早期における牛胎子の性判別を実施し、実用的な性判別診断 のガイドラインを作製した。また、超音波ガイドにより穿刺採取した牛羊水中の浮遊細胞のDNAをPCR法により増幅し、Y染色体特異的DNA配列に基づくプローブを利用して性判別の確定診断を行った。
超音波断層法による性判別については、延べ117頭の牛について妊娠35日から93日までの期間に調査を行った。その結果、妊娠45日以降では生殖結節が確認でき、合計90例について性判別が可能であった。性判別では生殖結節の位置が臍帯の後方にあれば雄で、後肢の後方で尾の前方にあれば雌と判定された。判定の正解率は雄胎子で93.6%(43/46)、雌胎子で90.9%(40/44)であり、また、臍から生殖結節までの距離は妊娠56日目から雌雄に差が見られ、それ以降の超音波診断で性判別が可能となることが明らかとなった。PCR法による牛羊水中DNA解析では、35例について穿刺を行い、33例から羊水の採取が可能であった。内訳は29例が羊水、4例が尿膜水であった。採取された羊水中および尿膜水中の浮遊細胞をPCR法により増幅し、Y染色体特有プローブにより性判別を行った。その結果、31例でDNAバンドが確認され、性判別の正解は93.5%(29/31)で、2例が不正解、また2例はDNAバンドが確認されず、判定不能であった。羊水の穿刺採取後、1週間以内に5頭で流産が見られた。
今回の研究結果は国内外の学会で研究発表するとともに、学術誌に投稿中である。

Research Products

• [Publications] Kamimura,S.: "Determination of fetal sex by PCR using fetal fluid aspirated by transvaginal ultrasound-guided amniocentesis in cows" Aust.Socie.Reprod.Biol.27. 70-70 (1995)
• [Publications] 上村俊一、他: "分娩後の牛の卵胞形成に及ぼすcarry-over effectの影響" 鹿大農学術報告. 45. 59-63 (1995)
• [Publications] 上村俊一: "牛の臨床繁殖における超音波診断法" 臨床獣医. 13. 20-28 (1995)