1994 Fiscal Year Annual Research Report
筋原線維形成の動態と機構に関する分子細胞生物学的研究
Project/Area Number |
06670010
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Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
嶋田 裕 千葉大学, 医学部, 教授 (70009116)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
豊田 直二 千葉大学, 医学部, 講師 (00188822)
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Keywords | 筋原線維形成 / コネクチン / ネブリン / アクチン / ミオシン / 分子種 |
Research Abstract |
1.筋原線維形成に対する細胞骨格(コネクチンとネブリン)の役割:筋原線維のI-Z-Iを構成する蛋白質(αアクチニン、アクチン)がまず線維上に出現し、この構造にコネクチンとミオシンが同調して取り込まれるのが観察された。すなわちミオシンとコネクチンの出現と分布は常に一致していることから、ミオシンのI-Z-Iへの取り込みにコネクチンが関与しているのではないかと考えられた。またアクチン、ミオシン、αアクチニンの縞が形成されたのちにネブリンの縞が形成されることから、ネブリンは筋蛋白質の正しい配列には関与していないと考えられた。 2.筋原線維形成過程におけるアクチンの動態:ビオチン標識したアクチンを培養心筋細胞に顕微注入すると、形成途上の筋原線維のA帯レベルと末端に取り込みがみえたので、この部でアクチンの重合が起こることが考えられた。また筋原線維末端延長線上にもアクチンが並んでいるのがみえ、これは筋原線維の延長に関係していると考えられた。標識したミオシンを注入すると、ミオシンは筋原線維のI帯レベルと終末アクチンフィラメントの部位に取り込まれた。すなわち、アクチンとミオシンの重合は相互のフィラメントの存在下に起こることが考えられた。 3.筋蛋白質isoformの動態:tagを付けたミオシンアルカリ軽鎖のcDNAを培養心筋細胞に発現させ、分子種毎の細胞内分布の違いを比較した。その結果、蛋白質の中央約1/3の領域がA帯への局在に重要な働きをもつことが予想された。
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[Publications] Masatoshi Komiyama: "Troponin and dystrophin in regenerating muscle fibers with and without denervation." Muscle & Nerve. 17. 1062-1064 (1994)
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[Publications] Masatoshi Komiyama: "Dynamics of actin and assembly of connectin (titin) during myofibrillogenesis in embryonic chick cardiac muscle cells in vitro." Developmental Dynamics. 196. 291-299 (1993)
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[Publications] Fujio Atsuta: "Distribution of connectin (titin),nebulin and α-actinin at myotendinous junctions of chicken pectoralis muscles: an immunofluorescence and immunoelectron microscopic study." Journal of Muscle Research and Cell Motility. 14. 511-517 (1993)
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[Publications] Katsunori Kouchi: "Incorporation of microinjected biotin-labelled actin into nascent myofibrils of cardiac myocytes: an immunoelectron microscopic study." Journal of Muscle Research and Cell Motility. 14. 292-301 (1993)
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[Publications] Yutaka Shimada: "Distribution of connectin (titin) and transverse-tubules at myotendinous junctions." Scanning Microscopy. 7. 157-163 (1993)
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[Publications] Naoji Toyota: "Expression of troponin C genes during development in the chicken." International Journal of Developmental Biology. 37. 531-537 (1993)
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[Publications] Naoji Toyota: "Developmental Cardiology. Inborn Heart Diseases: Developmental Mechanisms" Futura,N.Y.(印刷中),