1994 Fiscal Year Annual Research Report
炎症細胞における血小板活性化因子(PAF)受容体の発現と作用
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06670160
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
和泉 孝志 東京大学, 医学部(医), 助手 (70232361)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
本田 善一郎 東京大学, 保健センター, 助手 (70238814)
清水 孝雄 東京大学, 医学部(医), 教授 (80127092)
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| Keywords | 血小板活性化因子 / 受容体 / 遺伝子発現 / 炎症細胞 |
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| Research Abstract |
ヒト好酸球性白血病細胞(EoL-1細胞)におけるPAF受容体の発現調節が分化誘導刺激によって行われることを、mRNA量の解析、放射標識化合物を用いた結合実験、細胞内カルシウムの反応性によって確かめた。さらに抗PAF受容体ポリペプチドに対するモノクローナル抗体を作製し、それを用いたFACScanによる表面抗原の解析を行い、PAF受容体タンパクがEoL-1の分化誘導によって出現することも確認した。これらの実験結果によりPAFの主要な標的細胞の1つである好酸球は、その分化成熟過程においてPAF受容体数を増し、PAFに対する反応性を獲得していくことが示唆された。
PAF受容体遺伝子は2種類の異なったプロモーターによって転写調節を受けており、2つの異なったタイプ(すなわち白血球タイプと組織タイプ)の2種類のmRNAを産生する。このうち白血球タイプのmRNAのプロモーター領域にはNF-κBの3回繰返し配列が存在することがわかっている。このプロモタ-の機能を調べる目的で、CAT遺伝子を結合したコンストラクトを作製し解析を行った。その結果、ホルボールエステル(TPA)やPAFそのものによって転写が促進されることが判明した。このことは、PAF受容体の遺伝子発現が、炎症性刺激(PAFそのものを含む)によってポジティブに制御されていることを示している。
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[Publications] Takano,T.et al.: "Role of cytoplasminc tail phosphorylation sites of paltelet-activating factor receptor in agonist-induced desensitization." J.Biol.Chem.269. 22453-22458 (1994)
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[Publications] Mutoh,H.et al.: "Platelet-activating factor (PAF) positively auto-regulates the expression of human PAF recptor transcript 1 (Leukocyte-type) through NF-κB." Biochem.Biophys.Res.Commun.205. 1137-1142 (1994)
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[Publications] Mutoh,H.et al.: "Positive and negative regulations of human platelet-activating factor receptor transcript 2 (Tissue-type) by estrogen and TGF-β1." Biochem.Biophys.Res.Commun.205. 1130-1136 (1994)
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[Publications] Izumi,T.et al.: "Expression of human platelet-activating factor receptor gene in EoL-1 cells following butyrate-induced differentiation." Biochem.J.305. 829-835 (1995)
