1995 Fiscal Year Annual Research Report
鉄キレート誘発ラット腎細胞癌におけるras,p53遺伝子変異の検討
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06670228
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
濱崎 周次 岡山大学, 医学部・附属病院, 助教授 (50208576)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡田 茂 岡山大学, 医学部, 教授 (20033201)
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| Keywords | ras / p53 / ラット / 化学発癌 / 腎癌 / ラジカル |
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| Research Abstract |
鉄キレート化合物である鉄NTAを実験動物に投与すると高率に腎細胞癌が発生する.この鉄NTA発癌に鉄関連ラジカルによるDNA修飾が関与している可能性がある.本研究は鉄NTA誘発腎癌におけるrasおよびp53遺伝子変異を検索し、1)これらの腫瘍関連遺伝子の発癌過程への関与と、2)ラジカルによるDNA修飾が変異を誘発している可能性について検討した.本年度は昨年度とあわせ16個の鉄NTA誘発腎癌について検討を行った。K-,H-,N-ras遺伝子についてpolymerase cain reaction (PCR)増幅後direct seguencingにより変異を検索した.またp53遺伝子exon5,6,7についてはPCR-SSCP法により変異のscreeningを行い,さらにdirect sequencingにより変異の有無を検討した.
K-,H-,N-ras遺伝子の点変異のhot spotであるexon1のcodon12,13およびexon2のcodon61いずれにも変異は認められなかった。p53遺伝子の検索では2腫瘍において、exon6にアミノ酸置換をともなう点変異が認められた。これらの2変異はいずれもconserved domain領域外にあり,またヒト腫瘍で変異が報告されていないコドンであった。以上より鉄NTAによる腎癌の発生にはras・p53遺伝子の変異が関与している可能性は低いと考えられた。鉄関連ラジカルはDAN中のグアノシンを酸化し8ヒドロキシグアノシン(8OHdG)を生じ、この修飾によりG→T,G→Aなどの塩基置換が発生すると報告されている。今回p53遺伝子で観察された変異はいずれもC→T(G→A)置換であり8-OHdG形成によるものとして矛盾しないが、変異の発生頻度が低く、またG→A置換は他の塩基修飾でも生じ特異性が高くないことからラジカル修飾による変異と結論することはできない。
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[Publications] A.Kondo.: "Renal cysts and associated renal tumours in male ddY mice injected with ferric nitrilotriacetate." Virchow Archives.427. 91-99 (1995)
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[Publications] Y.Kikuchi.: "Cloning of the rat homologue of the von Hippel-Lindau tumor suppressor gene and its non-somatic mutation in rat renal cell carcinoma." Japanese Journal of Cancer Research. 86. 905-909 (1995)
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[Publications] J.Deguchi.: "Sex hormone-dependentrenal cell carcinogenesis induced by ferric nitrilotriacetate in Wistar rats." Japanese Journal of Cancer Research. 86. 1068-1071 (1995)
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[Publications] T.Akiyama.: "Absence of ras mutations and low incidnce of p53 mutations in renal cell carcinomas induced by ferric nitrilotriacetate." Japanese Journal of Cancer Research. 86. 1143-1149 (1995)
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[Publications] S.Okada.: "Iron induced tissue damage and cancer : The role of reactive oxygen species free radicals." Pathology international.(掲載予定).
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[Publications] T.Ogino.: "Oxidative damage of bovine serum albumin and other enzymeproteins by iron chelate complexes." Biochimica et Biophysica Acta.1245. 359-365 (1995)
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[Publications] S.Okada: "In Oxidative Stress and Aging (R.G.Cutler,L.Packer,A.Mori,eds.),Birkhaeuser Verlag Basel/Switzerland" Iron-induced carcinogenesis in experimental animal : A free radical mechanism of DNA damage and carcinogenesis, (1995)
