カテプシンEの遺伝子発現調節機構及び膵癌特異的発現の解析

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06670531
• Research Institution: 福井医科大学
• Principal Investigator: 東 健 福井医科大学, 医学部, 助手 (60221040)
• Keywords: カテプシンE / 膵癌

Research Abstract

我々はこれまでに、カテプシンEのcDNA及び遺伝子のクローニングに成功し、さらに、微量蛋白であるヒトカテプシンEの酵母を用いた組み換えヒトカテプシンEの大量精製を行ってきた。本研究はこれまでの成果を基に、カテプシンEの発現調節機構を解明し、病態、特に膵癌との関与を明らかにするものであり、これがひいてはカテプシンEの生理機能解明の手掛かりになるものと期待される。カテプシンEの病態との関連を検討したところ、免疫組織化学的解析で、カテプシンEが膵管細胞癌の100%(15例)に発現していることが認められた。正常膵では免疫組織化学的、酵素学的にも検出されず、膵臓でのカテプシンEの発現は癌特異的であった。カテプシンEが膵癌のマーカーとなる可能性を検討するため、平成6年度は、膵癌例の血清及び膵液中のカテプシンEの存在を、ウエスタンブロットで解析したところ、血清中には検出できなかったが、膵癌例の膵液に高率に(4例中3例)認められた。我々は酵母を用い組み換えヒトカテプシンEを精製し、さらに、抵カテプシンEモノクローナル抗体を作成し、これらを用いenzyme link immunosorbent assay(ELISA)システムを確立し、カテプシンEの定量測定を簡便化した。ELISAにより、膵癌、慢性膵炎例の冷凍保存膵液中のカテプシンEを定量し、膵癌診断能を検討したところ、膵癌では10例中8例(80%)、膵炎では22例中2例(9%)に膵液中のカテプシンEが認められ、膵液中のカテプシンEは膵癌のマーカーになりうると考えられた。