1994 Fiscal Year Annual Research Report
心筋虚血/再灌流時のCa過負荷におけるNa/Ca交換及びNa/H交換の役割
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06670705
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
林 秀晴 浜松医科大学, 光量子医学研究センター, 助教授 (50135258)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺田 肇 浜松医科大学, 医学部, 助手 (50252177)
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| Keywords | 心筋虚血 / 再灌流 / カルシウム過負荷 / 細胞内ナトリウム濃度 / Na / Ca交換 / ストロファンチジン / Na / H交換 / ヘキサメチロンアミロライド |
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| Research Abstract |
モルモットの心室筋細胞にSBFI/AM(5μM)とfluo-3/AM(10μM)を同時に室温で30分間負荷し,in vivo calibration curveを作成して、[Na^+]iと[Ca^<2+>]iの同時測定法を確立した.CCCP(5μM)とamytal(3.3mM)による代謝阻害時の[Na^+]iと[Ca^<2+>]iを測定した。[Na^+]iはコントロールの6.2±0.5mM(平均±SE、n=31)から20分後には18.6±1.6mM(p<0.01)に上昇した。[Ca^<2+>]iは20分後には変化を認めず、50分後にはコントロールの167±14%に上昇して27個(89%)の細胞が拘縮した。代謝阻害20分後よりglucose(10mM)を投与すると、投与30分後に[Ca^<2+>]iは442±72%に上昇した(p<0.01)。また、Na^+/H^+交換阻害剤であるHMA(1μM)により[Na^+]i上昇を抑制するか、または無Ca^<2+>溶液の灌流により、代謝阻害時の[Ca^<2+>]i上昇が抑制された。また、ジギタリス剤であるstrophanthidin(500μM)投与時と比較すると、[Na^+]iの上昇には両者で差を認めなかったが、代謝阻害時の[Ca^<2+>]i上昇はstrophanthidin投与時に比し有意に低かった。以上より、代謝阻害時の[Ca^<2+>]i上昇はNa^+/Ca^<2+>交換によるが、その活性は抑制されていることが示された。代謝阻害時にmicroelectrodeにより測定した膜電位は-80mVであり、[Na^+]iを18mMとして計算したNa^+/Ca^<2+>交換の逆転電位からは、代謝阻害時にはNa^+/Ca^<2+>交換はreverse modeになっていることが示唆された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Hayashi Hideharu: "Simultaneous measurement of intracellular Na^+ and Ca^<2+> during K^+-free perfusion in isolated myocytes" American Journal of Physiology. 266. C416-C422 (1994)
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[Publications] Hayashi Hideharu: "Ca^<2+> waves and intracellular Ca^<2+> concentration in guineapig and rat myocytes" Japanese Heart Journal. 35. 673-682 (1994)
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[Publications] Hayashi Hideharu: "Fluorescence imaging of intracellular Ca^<2+>" Journal of Pharmacological and Toxicological Methat. 31. 1-10 (1994)
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[Publications] Satoh Hiroshi: "Regulation of [Na^+]i and [Ca^<2+>]i in guinea pig myocytes:dual-loading of fluorescent indicators SBFI and fluo 3." American Journal of Physiology. 266. H568-H576 (1994)
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[Publications] Terada Hajime: "Simultaneous measurement of [Na^+]i and Ca^<2+> transients in an isolated myocytes:effects of strophantidin." Biochemical Biophysical Research Communications. 203. 1050-1056 (1994)
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[Publications] Katoh Hideki: "The role of Na^+/H^+ exchange and Na^+/K^+ pump in the negulation of [Na^+]i during metabolic inhibition in guinea pig myocytes." Biochemical Biophysical Research Communications. 203. 93-98 (1994)
