心筋症ハムスターにおけるADP/ATP担体蛋白異常の分子生物学的解析

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06670745
• Research Institution: Jikei University School of Medicine
• Principal Investigator: 加藤 光敏 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (60177475)
• Keywords: ADP / ATP Carrier protein / cardiomyopathic hamster

Research Abstract

拡張型心筋症hamsterであるJ2N,Bio14.6を用いてADP/ATP担体蛋白質に関して分子生物学的手法を用いて解析を行なった。ADP/ATP担体蛋白質、以下AACはミトコンドリア内膜に存在するADP、ATPの交換輸送を行う重要な蛋白質である。まずAACのクローニングはGolden hamsterの心筋よりmRNAを抽出し逆転写酵素を用いてcDNAを合成した。cDNAよりλgt10 phage vectorでcDNA libraryを作成した。またヒトfibloblast由来のcDNA liblaryよりヒトのAAC cDNAの塩基配列をもとにして設計したプライマーを用いて、PCR法にてAAC cDNAクローンを得た。これをプローブとして、hamsterのcDNA libraryよりplaque hybridization法を用いてAAC cDNAをisoenzymeのT1についてクローニングすることに成功した。次にAACのレベルにおいての発現をdot blot hybridizationを用いて検討したところ、mRNAレベルでの発現はNormal hamsterが最も強く心筋症の程度が強いhamsterほどAACの量的異常と共にmRNAレベルでの発現低下が存在していた。現在さらに心筋症hamsterのADP/ATP担体蛋白質の遺伝子異常に関し検討中である。

Research Products

• [Publications] KATO M: "Molecular biological and quantitative abnormalities of ADP/ATP carrier protein in cardiomyopathic hamsters" Euro.Heart J.(in press). (1995)
• [Publications] KATO M: "Molecular biological changes of adenine nucleotide translocator in J-2-N cardiomyopathic hamsters" Mechanisms of Heart Failure. (in press). (1995)
• [Publications] KATO M: "Quantitative abnormalities of ADP/ATP carrier protein in cardiomyopathic hamsters." The Adapted Heart. Chap 7. 91-97 (1994)
• [Publications] KATO M: "Abnormalities of ADP/ATP carrier protein in J-2-N cardiomyopathic hamsters." Mol Cell Biochem.119. 89-94 (1993)
• [Publications] KATO M: "Effects of Angiotenis-Converting-Enzyme inhibitors and prostagrandin E_1 derivatives on cardiomyopathic hamster." The Cardiomyopathic Heart. Chap 17. 157-164 (1994)
• [Publications] TAKEDA N KATO M: "Altelations of myocardial contractility in cardiomyopathic J-2-N hamsters" The Cardiomyopathic Heart. Chap 23. 23-30 (1994)