ペルオキシソーム病モデルマウス作製による病態解明に関する研究

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06670782
• Research Institution: Gifu University
• Principal Investigator: 下澤 伸行 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (00240797)
• Keywords: ペルオキシソーム / モデルマウス / 神経細胞移動障害

Research Abstract

Zellweger症候群は細胞内小器官の1つであるペルオキシソームが先天的に欠損する遺伝病で中枢神経のmigration disorderなど種々の臓器に重篤な異常を呈する。本研究ではジーンターゲッティング法を用いてペルオキシソーム欠損モデルマウスを作成し、中枢神経病変の発症機構を解明したいと考えている。平成6年度はペルオキシソーム形成因子の人とマウスのゲノムのクローニングを行ってきたが、幸い両者のクローニングに成功した。
ペルオキシソーム形成因子1(peroxisome assembly factor-1:PAF-1)のヒトゲノム遺伝子はヒトPAF-1 cDNAをプローブにしてヒトの胎盤由来のゲノムライブラリーよりスクリーニングした結果、4つのエキソンと3つのイントロンよりなる全長約20Kbの遺伝子で、そのうち開始メチオニンより17bp上流より全翻訳領域、poly Aシグナルまでが第4エキソンに含まれていた。このゲノム構造の解明により患者のゲノムを用いて簡便な変異解析が可能となり、PAF-1遺伝子上2番目の新しいナンセンス変異の同定に成功している。
一方、マウスPAF-1遺伝子はラットのPAF-1 cDNAをプローブに作成予定のモデルマウスと同じストレインである129SVマウスのゲノムライブラリーよりスクリーニングし、ヒトの第4エキソンに相当する領域を含んでいる3つのクローンを得た。現在、そのうちの全長13kbのクローンを用いて翻訳領域をneo遺伝子に置き換えたターゲッティング用ベクターを作成中であり、平成7年度はこのベクターを用いてモデルマウスを作成予定である。
作成したモデルマウスについてはペルオキシソームの有無を確認するとともに各臓器の病理像をヒトと比較する。また胎生期よりの中枢神経の発生過程を正常マウスと比較してmigration disorderの発症機構を解明する。

Research Products

• [Publications] Mitsuo Masuno,Nobuyuki Shimozawa et ol.: "Assigninent of the human peroxisome assembly factor-1 gene(PXMP3) responsible for Zellweger Jyndrome to Chromosome 8q211 by fluorescence in s hybridization" GENOMICS. 20. 141-142 (1994)
• [Publications] Toshiro Tsukamoto,Nobuyuki Shimozawa,et al: "Peroxisome assembly factor-1:Nonsense mufation in a pevoxisome-deficient chinese lnmsfer ovary cell mutant and deletion analysis" Molecular and Cellular Biolgy. 14. 5458-5465 (1994)
• [Publications] Yasuyuki Suzuki,Nobuyuki Shimozawa,et al: "Novel subtype of peroxisomal acyl-CoA oxidase deficiency and bifunctional enzyme deficiency with defectable enzyme Protein:Ldenfification by mems of complemenfation analysis" Am.J.Hom.Genet. 54. 36-43 (1994)
• [Publications] 下沢伸行: "ペルオキシソーム病の遺伝子解析-Zellweger症候群と副腎白質ジストフィー-" 小児科臨床. 47. 2427-2434 (1994)
• [Publications] 編集代表 中井利昭: "遺伝子診断実践ガイド" 中外医学社, 485 (1995)