リソゾーム病の遺伝子異常,酵素蛋白異常と表現型に関する研究

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06670818
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 田中 あけみ 大阪市立大学, 医学部, 講師 (30145776)
• Keywords: 遺伝子解析 / GM_2ガングリオシドーシス / Tay-Sachs病 / Sandhoff病 / β-hexosaminidase,α subunit / β-hexosaminidase,β subunit

Research Abstract

1 β-ヘキソースアミニダーゼ、αサブユニット遺伝子について、沖縄県のTay-Sachs病の一症例で本土と異なる新しい変異(Arg170→Trp)を明らかにした。患者は、ホモ接合体であった。厚生省の先天性代謝異常症スクリーニングのデータによると、沖縄県では、フェニールケトン尿症をはじめ、患者頻度が本土と異なっていることが知られている。Tay-Sachs病においても同様のことが推測されるので、日本の本州を中心に高頻度に認められているmajor mutationと、このArg170→Trpについて、沖縄県の一般人口集団における遺伝子頻度を検索中である。
2 異常αサブユニットが正常βサブユニットと結合する状態は、αサブユニットの変異の場所によって異なることが考えられる。前述のmajpr mutation(IVS5,-1G→T)では、エクソン6が欠失した安定なmRNAが作られ、アミノ酸配列では、32個のアミノ酸が欠落するがフレームシフトはおこさない。これのホモ接合体患者の酵素学的検索で、この変異αサブユニットは安定でβサブユニットと二量体を作ることが推測された。Major mutationの変異を持つαサブユニットcDNAを、正常のβサブユニットのcDNAと同時にCOS細胞で発現させ、ヘキソースアミニダーゼA(αβ)およびB(ββ)のおのおのに対する抗体をそれぞれ用いて、ウェスタンブロッティングと、発現蛋白を抗体精製して分析することにより検討したところ、このことを支持する結果を得た。
3 βヘキソースアミニーダーゼ、βサブユニットの遺伝子異常症(Sandhoff病)について、日本人の乳児型患者3症例を解析して遺伝子変異を明らかにした。1例は、ミスセンス変異(Pro405→Leu)で2例は、イントロン10内の点変異(-17A→G)により起こったスプライシング変異であり、3例ともホモ接合体であった。

Research Products

• [Publications] 田中 あけみ: "Gaucher病・Tay-Sachs病・Sandhoff病" Clinical Neuroscience. 12. 412-415 (1994)
• [Publications] Akemi Tanaka: "Molecular Genetics of Tay-Sachs Disease in Japan" J.Inher.Metab.Dis.17. 593-600 (1994)
• [Publications] 長田 みづほ: "最近5年間におけるリソソーム病の出生前診断" 臨床化学. 23. 221-227 (1994)
• [Publications] 田中 あけみ: "GM_2-ガングリオシドーシス" 遺伝子診断実践ガイド(中外医学社)総. 485ページ. 62-67 (1995)