1995 Fiscal Year Annual Research Report
イヌモデルを用いた血友病Aインヒビターの治療に関する研究
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06670819
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
嶋 緑倫 奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (30162663)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤本 好克 奈良県立医科大学, 医学部, 助手 (10264863)
田中 一郎 奈良県立医科大学, 医学部, 助手 (00201616)
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| Keywords | 血友病A / インヒビター / 第VIII因子 |
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| Research Abstract |
1.血友病犬:血友病A犬との交配を目的に現在2匹の血友病A保因犬を飼育中である。
2.血友病インヒビターイヌモデル測定系の確立:血友病A保因犬および、正常イヌ血漿を用いて、活性化部分トロンボプラスチン時間(PTT)、プロトロンビン時間(PT)、第VIII因子活性などの凝血学的各種測定系を確立し正常範囲を設定した。さらに、イヌインヒビターのインヒビター力価測定系を確立した。
3.イヌインヒビターの免疫学的解析:イヌインヒビターの免疫学的測定系の確立のために、まず、ヒトインヒビターの特異的抗第VIII因子サブクラス測定系を確立した。方法は、純化第VIII因子をプレートに固相化して、インヒビターサンプルを添加後ペルオキシダーゼ標識抗lgG_1,lgG_2,lgG_3およびlgG_4を添加し、比色定量した。測定限界はヒトインヒビターでは0.5〜1.0ベセスダ単位で、lgG_4が優位であった。
4.インヒビター中和ペプチド:インヒビター中和ペプチドの開発を目的にイヌインヒビターと高いホモロジーを有する第VIII因子軽鎖認識各種ヒトインヒビターのエピトープ解析を軽鎖由来リコンビナントフラグメントにより行い、共通エピトープをC2ドメイン内のアミノ酸残基2248-2312に同定した。方法は、各種リコンビナントフラグメント(フラグメントL4:アミノ酸残基1974-2332,および、L4のアミノ末端およびカルボキシ末端を順次除去した変異フラグメントL4.1-L4.18)を電気泳動後、イムノブロット法にて各インヒビターとの反応性を検討した。
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[Publications] Shima M.: "Common inhibitory effect of human anti-C2 domain inhibitor alloantibonies an factor VIII b,nding to von willebrund fuctor" British Journal of Haematology. 91. 714-721 (1995)
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[Publications] Shima M.: "Measurement of anti-tactor VIII IgG,IgG_4 and IgM allcan Ghodres in preuonsly untreated hemophilia A patents treated with reconbinant factor VIII" International Journal of Hematology. 62. 35-43 (1995)
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[Publications] Scandella D.: "Some factor VIII inhibitor untibodies recoynige a common epitopecorespondny to C2 domain amino acid 2248 throgh 2312,which overlap a phasp holipid binding site" Blood. 86. 1811-1819 (1995)
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[Publications] Nagase H.: "Effect of depolynerized nolothurian glycosaminoglycan(UMG) on the activation of factor VIII and factor V by Chrombn" Journal of Biochemistry. 119. 63-69 (1996)
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[Publications] 嶋 緑倫: "臨床DNA診断法" 金原出版, 1134 (1995)
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[Publications] 嶋 緑倫: "遺伝子病マニュアル 上" 中山書店, 425 (1995)
