1994 Fiscal Year Annual Research Report
初期胚発育生存能の評価法の開発とその応用による胚発育への微小環境因子作用の検討
Project/Area Number |
06671632
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
堤 治 東京大学, 医学部(病), 助教授 (60134574)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤原 敏博 東京大学, 医学部(病), 助手 (80219063)
矢野 哲 東京大学, 医学部(病), 講師 (50182390)
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Keywords | oocyte / embryo / glucose / glucoce tmnsporter / hexokinase / epidermal growth factor / activin |
Research Abstract |
卵自身の内分泌代謝活動を研究する方法を各種開発し、特に非代謝性のグルコースを用い1個の卵のグルコース取り込み能の発達解析法を確立した。卵を培養発育させ、各種パラメーターを用い体内発育卵と比較した。培養液に各種物質を添加卵の発育生存能に対する効果を検索した。 受精卵が発育するにつれて取り込み能が発達すること、体外培養によって発育した卵では取り込み能発達に遅延があり着床能も低いことを明らかにした.この発達遅延は糖輸送担体GLUTの発現が遅れることが原因であることを微量ウエスタンブロット法、RTPCR法により蛋白、mRNAレベルで明らかにした。体外培養の条件に問題があると考え環境因子や生理活性物質の検定を行なったところ増殖因子であるepidermal growth factor(EGF)がGLUTの発現を促進しグルコース取り込みを亢進し着床能も増加させ、生理活性物質であることが明らかになった。 ヒトを含めた未発育の卵はグルコースの利用性が悪く、発育途上で利用能が高まることが知られた。2-DGの取り込みを用いた動物実験では、胚発育に伴い数百倍の上昇を認めた。この変化は糖輸送担体(GLUT1)の発現と代謝酵素ヘキソキナーゼ活性によることが本研究で明らかになった。この発達は培養卵では遅延し糖取り込み能が卵発育生存能検定へ応用できることが示唆された。EGFはGLUT1の発現を制御し同時に着床能も高め、卵の発育促進因子であることも明らかになった。
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[Publications] O.Tsutsumi,et al.: "Phosphofructokinase activity as a measure of maturation of rat oocytes developed in vivo and in vitro." Hormone Research. 41. 63-67 (1994)
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[Publications] T.Ayabe,et al.: "Hexokinase activity in mouse embryo developed in vivo and in vitro." Human Reproduction. 9. 347-351 (1994)
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[Publications] T.Ayabe,et al.: "Impaired follicular growth and abnormal luteinizing hormone surge in luteal phase defect." Fertitlity and Sterility. 61. 652-654 (1994)
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[Publications] O.Tsutsumi,et al.: "Intact sex determining region Y (SRY) in a patient with XY pure gonadal dysgenesis and a twin brother." Endocrine Journal. 41. 281-285 (1994)
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[Publications] Y.Morita,et al.: "Glucose transporter GLUT1 mRNA expression in the ontogeny of glucose incorporation in mouse preimplantation embryos." Biochem Biophys Res Commun. 199. 1525-1531 (1994)
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[Publications] Y.Morita,et al.: "In vitro freatment of embryos with epidermal growth factor improves viability and increases the implantation rate of blastocysts transferred to recipient mice." Am J Obstetr Gynecol. 171. 406-409 (1994)
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[Publications] O.Tsutsumi,et al.: "Ares-Serono Symposia SeriesFrontier in Endocrinology,Vol.4" Eds.T.Mori,T.Aono,T.Tominaga and M.Hiroi, 794 (1994)
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[Publications] 堤 治他 望月、武谷編: "図説産婦人科" メジカルビュー社, (1994)