1996 Fiscal Year Annual Research Report
シスプラチン耐性に関与する蛋白、遺伝子の同定及びクローニング
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06671641
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
吉川 史隆 名古屋大学, 医学部, 講師 (40224985)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
玉腰 浩司 名古屋大学, 医学部, 助手 (30262900)
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| Keywords | シスプラチン / カルボプラチン / 耐性 |
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| Research Abstract |
蛋白レベルからはシスプラチン50倍耐性株で親株と比較して明らかに2本のバンドの増強が認められ、逆に1本のバンドの減弱と1本の消失が認められた。しかしながら特異的バンドの抽出は多種類の蛋白が混在して困難であった。薬剤耐性にはグルタチオンによる解毒の関与が報告されている。そこで我々はグルタチオンカラムでまづ蛋白をグルタチオン結合蛋白だけにした後に、電気泳動した。その結果、副数のバンドの消失や増強を認め現在アミノ酸分析中である。卵巣癌細胞株(NOS2)とそのシスプラチン耐性株(NOS2CR2)を大量培養し、各々グルタチオンカラムによりグルタチオン結合蛋白を抽出した。NOS2CRに特異的に認められたバンドを切り出しアミノ酸配列を調べた。その結果最も濃いバンドはグルタチオン-S-トランスフェラーゼであった。またその他のバンドも抽出しアミノ酸配列を調べたが蛋白が修飾されており従来の方法ではアミノ酸配列を決定できなかった。これらのバンドは薄いため十分な量が採取できなかった。さらに大量培養し同定する必要がある。一方、プラチナ系抗癌剤としてはシスプラチン以外にカルボプラチンとアクプラが市販されておりカルボプラチン耐性株(NOS2CBR)を作成しプラチナ系抗癌剤(シスプラチン、カルボプラチン、アクプラ、NK121、DWA2114R、SCT-078)だけでなく他の一般的抗癌剤との交叉耐性を調べた。NOS2CBRはカルボプラチンに対して4.1倍耐性でシスプラチン、アクプラにそれぞれ5.7、5.1倍の交叉耐性を示した。一方、NOS2CR2はシスプラチンに16.3倍、カルボプラチンに10.4倍、アクプラに12.5倍の交叉耐性であった。即ち、プラチナ系耐性株は薬剤は異なっても同系の薬剤に対して強い交叉耐性を有しており、同一の耐性機序が働いているものと考えられる。
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[Publications] 三澤俊哉: "新規白金誘導体ACT-078とCDDP,cBDCAとの交叉耐性に関する検討" 癌と化学療法. 22. 569-571 (1995)
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[Publications] N.H.Obata: "Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II inhibitor,on adriamycin-resistance of human ovarian cancer cells." Biochem.Biochm.Biophys Res. Commun.215. 566-571 (1995)
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[Publications] A.O.Sawamura: "Transfection of human cytochrome P-450 reductase cDNA and its effect on the sensitivity to toxins." Oncology. 53. 406-411 (1996)
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[Publications] Y.Wakahara: "The combination on Effect of the Anti-Fas Antibody and Chemotherapevtio Drugs in Ovarian Cancer cells in vitro." Oncology. 54. 48-54 (1997)
