1994 Fiscal Year Annual Research Report
口腔マイコプラズマ膜蛋白質のIgG Fe部位との結合様式と生物学的活性
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06671802
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
渡邊 継男 北海道大学, 医学部, 教授 (10064362)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴田 健一郎 北海道大学, 歯学部, 助手 (50145265)
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| Keywords | Mycoplasma salivarium / 細胞膜タンパク質 / IgG Fe結合活性 / マイト-ジエン / MHC class II抗原 |
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| Research Abstract |
ヒトIgG Fe部位と結合するMycoplasma salivarium細胞の膜タンパク質(分子量、90kDa:90kp)の精製
1.M.salivarium ATCC 23064株をPPLO serum fraction(IgGを含まない)添加PPLO broth(100l)で培養し、細胞(1g of protein)を集め、超音波で破砕して、精製膜標品(0.45g of protein)を調製した。
2.膜標品をTriton X-100(1%)/sodium acetate buffer(pH6.0)に浮遊させて、37℃で1時間処理して、90kpを可溶化した。
3.可溶化画分をCM-Sepharose FF,次にDEAE-Sephacelでcolumu chromatographyを、さらにchromatofocusingを行い、精製90kp(2mg of protein)を得た。
90kpの性状
1.等電点がpH5.5、至適pHが7.0、pH5.5で不可逆的に失活した。
2.IgG Fe断片との結合活性はヒトIgGならびにIgMで阻害された。
3.concanavalin Aに対して強い親和性を示した。
IgG Fe断片との結合はmannoseで阻害され、Mn、Ca、Cuイオンで増強された。
4.mouseのBならびにT細胞に対してmitogen活性を示した。
5.Raji細胞ならびにヒト抹消血由来単球のclass II抗原の発現を促進した。
6.精製90kpの量が少なかったために、5.と6.はそれぞれ一回の実験結果であるので、さらに確認のための実験を繰り返す必要がある。
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[Publications] 柴田健一郎: "Membrane proteins with molecular masses of 88,90 and 150 kDa are responsible for binding of human IgG Fc fragment to the native cells of Mycoplasma salivarium." FEMS Microbiol.Lett.123. 305-310 (1994)
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[Publications] 沢禎彦: "Purification and characterization of a membrane protein (90kDa) from Mycoplasma salivarium.which binds IgG Fe fragment." Microbiol.Immunol.38. 257-262 (1994)
