1994 Fiscal Year Annual Research Report
破骨細胞における接着因子とタンパク分解酵素の局在と生理機能の解析
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06671827
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
佐々木 崇寿 昭和大学, 歯学部, 助教授 (50129839)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
黒岩 美枝 昭和大学, 歯学部, 講師 (90153395)
立川 哲彦 昭和大学, 歯学部, 助教授 (10085772)
須田 立雄 昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)
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| Keywords | 破骨細胞 / 骨吸収 / インテグリン / カテプシン / 細胞培養 |
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| Research Abstract |
破骨細胞におけるタンパク分解酵素であるカテプシンを免疫組織化学的に検出し、その局在と生理機能を細胞レベルで明らかにするのが本研究の目的であった。従って種々のカテプシンに対する特異的な阻害剤を用い、in vivoおよびin vitroでの破骨細胞の骨吸収能に対する作用を解明した。特にin vitroでは、培養液中にE-64等の阻害剤を種々の濃度で添加し、破骨細胞の細胞構造や吸収窩の形成にどのような影響を与えるかを定性的ならびに定量的に評価した。すなわち固定した破骨細胞と共培養した象牙質切片(骨切片の代わりに用いる)を脱灰後、通法の如くエポキシ樹脂に包埋して透過型電顕で観察した。また一部の培養試料は非脱灰のまま象牙質切片から破骨細胞を剥離し、象牙質切片を乾燥後、反射電子検出器によって吸収窩の形成程度を観察した。さらに反射電子像をもとに、画像処理装置を用いて吸収窩の形成程度を定量的に解析した。その結果、これらの一連の方法によって破骨細胞におけるタンパク分解酵素の細胞内局在が明らかとなり、またこの酵素が破骨細胞による吸収窩の形成に必須な生理的役割を果たしていることが明らかとなった。
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[Publications] Sasaki Takahisa: "Recent Advances in Ultrastructural Assessment of Osteoclastic Resorptive Functions" Microscopy Research and Technique. (印刷中).
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[Publications] Debari Kazuhiro,Sasaki Takahisa et al.: "An Ultrastructural Evaluation of the Effects of cysteine-proteinase inhibitors on Osteoclastic Resortive Functions" Calcified Tissue International. (印刷中).
