水環境中の有害物質の危険性評価のための小規模汎用スクリーニング法に関する研究-目的に応じたバイオアッセイの最適化の検討

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06680522
• Research Institution: College of Technology, Toyama Prefectural University
• Principal Investigator: 楠井 隆史 富山県立大学短期大学部, 教授 (60153293)
• Keywords: bioassay / toxicity / mutagenicity / screening / industrial wastewater / hazard assessment

Research Abstract

1.変異原性試験方法として、昨年度用いたSOS‐Chromotestより安価な方法であるumuテストについて、その小規模化(マイクロプレート化)と高感度の改良について検討した。ます、試験管法で用いられていた酵素活性を求める式(Miller式)をマイクロプレートでの読みに換算する誘導した。次に、TA1535/pSK1002、NM2000、NM2009株を用いて、SDS濃度(0.1‐1.0%)、接触時間(15分-4時間)について結果、最適条件(SDS0.5%、15‐30分)を見いだした。また、培養・接触温度を37℃に統一することにより、より簡易に実施できるようになった。この結果、一度に試料を3試料(7希釈列×3組)程度も処理できるようになり大幅な処理効率の増加が得られた。
2.原因物質同定のために物理化学的操作(EDTA添加)とバイオアッセイの併用について検討した。その結果、海洋性発光細菌試験では100mg/L,藻類試験では1mg/Lまで有為な阻害効果を与えず添加できることが解かった。最適添加量時における各種重金属の有害性緩和効果について検討し、EDTA‐バイオアッセイの組合せによる同定の適用範囲と限界について知見を得た。
3.検討してきた小規模バイオアッセイ(海洋性発光細菌試験,藻類成長阻害試験,umu test)、新たな小規模バイオアッセイ(Thamnotoxkit,hydra)、およびミジンコ遊泳阻害試験(Daphnia magna)を用いて業種の異なる20種の産業排水(処理後)の有害性評価を実施した。85%(17/20)の試料において何らかの影響が認められた。この試料について、更に、EDTA添加や分析値の結果から原因有害物質について考察した。また、各種バイオアッセイの感受性、および検出能力について考察した結果、感受性の点では藻類試験、検出能力の点ではhydraが相対的に高いことが認められた。

Research Products

• [Publications] 楠井隆史: "水域管理へのバイオアッセイの適用" 日本水環境学会中部支部平成7年度講演要旨集. 13-16 (1995)
• [Publications] 楠井隆史: "マイクロプレートを用いた藻類成長阻害試験" 第1回エコトキシコロジー研究会・バイオアッセイ研究会合同研究発表会講演要旨集. 35-36 (1995)
• [Publications] 楠井隆史: "排水処理のバイオアッセイによる管理" Proceedings of Mini International Seminor on Ecotoxicology and Managemant of Chemicals. 31-34 (1995)