1996 Fiscal Year Annual Research Report

グルタミン酸受容体の遺伝子発現とその調節の分子的解析

Research Project

Project/Area Number	06680621
Research Institution	Yokohama City University
Principal Investigator	川本進横浜市立大学, 医学部, 講師 (80125921)
Keywords	グルタミン酸受容体 / NMDA受容体 / イオンチャネル / ヘルペスウイルスベクター / ウイルスベクター / 中枢神経系培養細胞 / 遺伝子発現 / 遺伝子治療
Research Abstract	単純ヘルペスウイルス1型(Herpes simplex virus 1;ここではHSVと略す)は、in vivoおよびin vitroでヒトを含め、非分裂細胞である神経細胞内で長期にわたる潜伏感染を成立させうる神経親和性ウイルスベクターとしての有力な候補の一つとして期待されている。本ウイルスに由来する欠損型非増殖性HSVベクター発現系の一般的な検討を行い、方法論的に改良、発展させることを進め、そのプロトコールを成書にまとめた(シュプリンガー・フェアラーク東京)。また、本発現系を用いて、グルタミン酸受容体チャネル(GluR)の解析を更に進めた。NMDA型グルタミン酸受容体チャネルは、2種(ε,ζ)のサブユニットファミリーにより構成され、εサブユニットの分子的多様性がその機能的多様性の基盤を担っている。εファミリーサブユニットを発現するHSVクローンを用いて昨年度に続いて、その分子的解析を更に進めつつ(FEBS Meeting(バルセロナ,1996)及びCold Spring Harbor Laboratory Meeting "Gene Therapy"(ニューヨーク,1996)等で発表)、新たに、CMVプロモーターの下流にζ1サブユニットcDNAを組み込んだHSVクローン(HSV/GluRζ1)を構築・解析した。すなわち、HSV/GluRζ1を感染させたRabbit skin cellについて、RT-PCR、ドットブロット及びウェスタンブロット解析により、その高い発現が確認でき、発現したζ1サブユニットタンパクを分子的、機能的に解析するとともに、εファミリーサブユニットと組み合わせて、in vivoでの感染実験を進めつつある。また、ζ1やα1(AMPA型GluR)サブユニットタンパク分子の種々の変異体を発現するバキュロウイルスクローンを構築して、リガンド結合領域の解析を進めた。また、遺伝子治療用ベクターとしての可能性も視野に入れ、インターフェロンγ、インターロイキン2や神経細胞死に阻害的に機能している未知遺伝子のHSVクローンを構築して、解析を進めている。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kawamoto,S.: "Arginine-481 mutation abolishes ligand-binding of the AMPA-selective glutamate receptor channel α1 subunit." Mol.Brain Res.(in press). (1997)
[Publications] Uchino,S.: "Analysis of the glycine binding domain of the NMDA receptor channel ζ1 subunit." Neuro Report. 8・2. 445-450 (1997)
[Publications] Kawamoto,S.: "Molecular and functional analyses of the glutamate receptor channel subunits expressed in baculovirus and herpesvirus vactor systems." Biochemical Society Transactions. 24・4. 567S (1996)
[Publications] Kawamoto,S.: "Expression of the NMDA receptor channel subunits using a baculovirus vector and a defective herpes simplex virus vector." FEBS'96 Abstracts. 186 (1996)
[Publications] 服部,聡: "ウイルスベクターを用いた遺伝子治療" 歯界展望. 88・6. 1373-1385 (1996)
[Publications] 服部,聡: "欠損型ヘルペスウイルスベクター系を用いたグルタミン酸受容体チャネルの発現・解析" 生化学. 68・7. 866 (1996)
[Publications] Kawamoto,S.: "Gene Therapy" Friedmann,T.,Mulligan R.,Nabel,G.and Weatherall,D. (Cold Spring Harbor Laboratory), 388 (1996)
[Publications] 服部,聡: "ニューロサイエンスラボマニュアル2:神経生物学のための遺伝子導入発現研究法" 中川八郎・吉川和明(シュプリンガー・フェアラーク東京), 363 (1997)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

グルタミン酸受容体の遺伝子発現とその調節の分子的解析

Principal Investigator

川本 進 横浜市立大学, 医学部, 講師 (80125921)

Research Products

[Publications] Kawamoto,S.: "Arginine-481 mutation abolishes ligand-binding of the AMPA-selective glutamate receptor channel α1 subunit." Mol.Brain Res.(in press). (1997)

[Publications] Uchino,S.: "Analysis of the glycine binding domain of the NMDA receptor channel ζ1 subunit." Neuro Report. 8・2. 445-450 (1997)

[Publications] Kawamoto,S.: "Molecular and functional analyses of the glutamate receptor channel subunits expressed in baculovirus and herpesvirus vactor systems." Biochemical Society Transactions. 24・4. 567S (1996)

[Publications] Kawamoto,S.: "Expression of the NMDA receptor channel subunits using a baculovirus vector and a defective herpes simplex virus vector." FEBS'96 Abstracts. 186 (1996)

[Publications] 服部,聡: "ウイルスベクターを用いた遺伝子治療" 歯界展望. 88・6. 1373-1385 (1996)

[Publications] 服部,聡: "欠損型ヘルペスウイルスベクター系を用いたグルタミン酸受容体チャネルの発現・解析" 生化学. 68・7. 866 (1996)

[Publications] Kawamoto,S.: "Gene Therapy" Friedmann,T.,Mulligan R.,Nabel,G.and Weatherall,D. (Cold Spring Harbor Laboratory), 388 (1996)

[Publications] 服部,聡: "ニューロサイエンスラボマニュアル2:神経生物学のための遺伝子導入発現研究法" 中川八郎・吉川和明(シュプリンガー・フェアラーク東京), 363 (1997)

川本進横浜市立大学, 医学部, 講師 (80125921)