Ras/MAPキナーゼシグナル伝達系における転写因子活性の制御機構

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06680684
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 後藤 由季子 京都大学, ウイルス研究所, 助手 (70252525)
• Keywords: MAPキナーゼ / MAPKK / Ras / シグナル伝達

Research Abstract

哺乳類培養細胞に恒常的活性型MAPKKとしてセリン218とセリン222をグルタミン酸に置換したMAPKKの突然変異体(SESE-MAPKK)とSESE-MAPKKのN末付近20アミノ酸を欠失させた変異体(dNSESE-MAPKK)を発現させたところ、SESE-MAPKKでは30%、dNSESE-MAPKKでは60%の内在性MAPキナーゼが活性化された。転写因子の活性を調べるために、TRE,SRE,CREのそれぞれのエレメントをCAT(クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ)につないだレポータープラスミドとともに培養細胞に形質転換した。SESE-MAPKKはTRE-CAT発現活性を1.2倍、SRE-CATを1.5倍、CRE-CATを0.7倍上昇させた。dNSESE-MAPKKはTRE-CAT発現活性を1.8倍、SRE-CATを1.7倍、CRE-CATを1.0倍上昇させた。dNSESE-MAPKKと共に野生型MAPキナーゼを共発現させると、TRE-CATは2.6倍、SRE-CATは3.1倍、CRE-CATは0.7倍になった。以上より、MAPキナーゼカスケードの活性化が、TRE及びSREの活性化に十分であり、CREの活性化には不十分であることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Fukuda,M.: "Analysis of the Rasp21/MAPK sigualing in vitro and in Xeuopus oocytes" J.Biol.Chem.269. 28354-28358 (1994)
• [Publications] Shiina,N.: "Microtubule severing by elongation factorla" Science. 266. 282-285 (1994)
• [Publications] Irie,K.: "Stimulatory effects of yeast and mammalian 14-3-3 proteins on the Rat protein kinase" Science. 265. 1716-1719 (1994)
• [Publications] Gotoh,Y.: "Characterization of recombinant Xeuopus MAP lcinaselcinase mutated at potential phosphorylation sites." Oncogene. 9. 1891-1898 (1994)
• [Publications] Kosako,H.: "Requirement for the MAP kinase kinase/MAP kinase cascade in Xeuopus oocytematuration" EMBO J.13. 2131-2138 (1994)
• [Publications] Mizoguchi,T.: "Characterization of two cDNAs that encode MAP kinase homologues in Arabidopsis thaliana and analysis of the possible role of auxin" Plant J.5. 111-122 (1994)