1994 Fiscal Year Annual Research Report
P2U受容体刺激による細胞内カルシウム上昇と細胞内情報伝達系
Project/Area Number |
06680688
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Research Institution | Shimane Medical University |
Principal Investigator |
榎本 浩一 島根医科大学, 医学部, 助手 (70112125)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古家 喜四夫 島根医科大学, 生理学研究所・生体膜部門, 助手 (40132740)
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Keywords | P2U受容体 / カルシウム / G蛋白 / アポトーシス |
Research Abstract |
1) マウス乳癌細胞のP2U受容体を遺伝子操作によりクローニングし、配列を決定した。さらに、その一次構造をヒト白血病由来細胞に強制発現し、P2U受容体の特性をもつカルシウム上昇反応を再現した。マウス乳癌のP2U受容体はG蛋白結合型、細胞膜を7回貫通するもので、ヒトやNG108-15細胞で得られたものとよく似ていたが完全には一致しなかった。 2) P2U受容体刺激による細胞内イノシトール1、4、5-3リン酸の上昇を測定した。アゴニストによる細胞内カルシウム上昇と用量が一致せず、イノシトール3リン酸の増大がかなり高濃度側にあるため、P2U受容体からG蛋白、PLC,IP3,Caという経路だけでは説明できない可能性がある。同時に調べたブラディキニンは受容体-G蛋白-PLC-IP3-Caの経路を賦活していた。 3) 細胞内にGTPを注入することでP2U受容体の反応が増強されることを確認した。G蛋白の寄与はあるけれども、この反応経路におけるG蛋白の特性は依然不明である。フッ化アルミニウムの投与、百日咳毒、コレラ毒がすべて無効なので、smg型G蛋白が介在している可能性がある。 4) P2U受容体のオーバード-ズにより細胞死が起こった。細胞内カルシウムの異常上昇に起因したアポートーシスである可能性がある。
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[Publications] Enomoto K,et al: "The increase in the intracellular Ca2+ concentration by mechanical stimulation is propergated via release of pyrophosphorylated nucleotides" Pflugers Archiv. 427. 533-542 (1994)
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[Publications] Sugihara M,et al: "Induction of differentiation by radiation and hyperthermia in neuroblastomaglioma hybrid cells." Cell Biochemistry and Function. 12. 137-142 (1994)
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[Publications] Yamasaki T,et al: "Analysis of intra-and intercellular calcium signalling in a mouse malignant glioma cells." Journal of Neurosurgery. 81. 420-426 (1994)
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[Publications] Kuramochi T,et al: "Contrasting effects of an ace inhibitor and a calcium antaonist on calcium transients in rat isolated cardiac myocytes." Cardiovascular Research,. 28. 1407-1413 (1994)
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[Publications] Kuramochi T,et al: "Calcium transients in single myocytes and membranous ultrastructures during the development of cardiac hyperthropy and heart failure in rats." Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 21. 1009-1018 (1994)
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[Publications] Enomoto K,Maeno T: "Modification of frequency augmentation-potentiation by GTP γS in the frog neuromuscular junction," Cell Biochemistry and Function. (in press). (1995)