1994 Fiscal Year Annual Research Report

エンドウカルコン合成酵素遺伝子の病原菌シグナルによる発現制御機構

Research Project

Project/Area Number	06760050
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	一瀬勇規岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)
Keywords	エリシター / サプレッサー / カルコン合成酵素 / CHS / フェニルアラニンアンモニアリアーゼ / PAL / 遺伝子発現 / 転写制御因子
Research Abstract	エリシターによりエンドウCHS遺伝子の転写誘導に必要なDNAシス領域を同定するために、まず、様々な長さのPSCHS1、PSCHS2遺伝子5´上流域をレポーター遺伝子であるクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子に結合させてキメラ遺伝子を構築した。次に、これらのキメラ遺伝子をエンドウ培養細胞由来のプロトプラストにエレクトロポレーション法で導入して、一時的なCATの活性を測定した。この時エレクトロポレーション後にエリシター処理を行う区と行わない区を設けてエリシター処理による影響も解析した。その結果、PSCHS1では少なくとも-242から下流に、PSCHS2では-377から下流にエリシター応答性転写活性領域が存在することが明らかとなった。更にCaMVの35Sミニマルプロモーターを用いたgain of function実験からPSCHS1の-242から-181までの61塩基だけでエリシターに応答してレポーター遺伝子の発現を増高させることが明らかになった。次に、両遺伝子の転写制御に関わる核内タンパク質因子について、ゲルシフトアッセイ法により解析した。その結果、PSCHS1の-242から-181の61塩基の断片やPSCHS2の-347から-158までの189塩基の断片はエリシター処理エンドウ組織から調製された核タンパク質と強く結合して移動度の遅い複合体(LMC)を形成することが明らかとなった。LMCの形成は核タンパク質を予めアルカリフォスファターゼで前処理することによって阻害されたことから、LMCの形成にはリン酸化が必要であると考えられる。また、エリシターで転写が誘導されるエンドウのPSPAL1とPSPAL2のプロモーターにも同様なLMCを形成する領域が存在しており、それぞれのLMCの形成は互いにLMCを形成するDNA断片により競合することが明らかにされた。以上の結果から、エリシターによる防御遺伝子の転写誘導にはLMCを形成する共通因子が関与している可能性が示唆された。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] T.Shiraishi et al.: "Suppressors: Determinants of specificity produced by plant pathogens." Plant Cell Phisiol.35. 1107-1119 (1994)
[Publications] H.Kato et al.: "Characterization of nuclear factors for elicitor-mediated activation of the promoter of the pea phenylalanine ammonia-lyase gene 1." Plant Physiol.(in press). (1995)
[Publications] T.Hiramoto et al.: "Signal molecules inducing systemic resistance and susceptibility in barley seedling." J.Phytopath.143(in press). (1995)
[Publications] T.Hiramoto et al.: "The relationship between systemic resistance induced by pruning and accumulation of antifungal substances in barley seedling." J.Phytopath.143(in press). (1995)
[Publications] K.Nasu et al.: "Suppression of the activation of chitinase and β-1,3-glucanase in pea epicotyls by endogenous suppressor from Pisum sativum." Ann.Phytopath.Soc.Lapan. (in press). (1995)
[Publications] M.Wada et al.: "Supprescin from a phytopathogenic fungus deactivates transcription of a plant defense gene encoding phenylalanine ammonia-lyase." J.Mol.Biol.(in press). (1995)
[Publications] 白石友紀: "病原菌シグナルと植物の防御応答" 日本農芸化学会誌. 69(印刷中). (1995)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

エンドウカルコン合成酵素遺伝子の病原菌シグナルによる発現制御機構

Principal Investigator

一瀬 勇規 岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)

Research Products

[Publications] T.Shiraishi et al.: "Suppressors: Determinants of specificity produced by plant pathogens." Plant Cell Phisiol.35. 1107-1119 (1994)

[Publications] H.Kato et al.: "Characterization of nuclear factors for elicitor-mediated activation of the promoter of the pea phenylalanine ammonia-lyase gene 1." Plant Physiol.(in press). (1995)

[Publications] T.Hiramoto et al.: "Signal molecules inducing systemic resistance and susceptibility in barley seedling." J.Phytopath.143(in press). (1995)

[Publications] T.Hiramoto et al.: "The relationship between systemic resistance induced by pruning and accumulation of antifungal substances in barley seedling." J.Phytopath.143(in press). (1995)

[Publications] K.Nasu et al.: "Suppression of the activation of chitinase and β-1,3-glucanase in pea epicotyls by endogenous suppressor from Pisum sativum." Ann.Phytopath.Soc.Lapan. (in press). (1995)

[Publications] M.Wada et al.: "Supprescin from a phytopathogenic fungus deactivates transcription of a plant defense gene encoding phenylalanine ammonia-lyase." J.Mol.Biol.(in press). (1995)

[Publications] 白石友紀: "病原菌シグナルと植物の防御応答" 日本農芸化学会誌. 69(印刷中). (1995)

一瀬勇規岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)