1994 Fiscal Year Annual Research Report
胃腸上皮生及び胃癌において高頻度に欠失する遺伝子の同定
Project/Area Number |
06770126
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
国安 弘基 広島大学, 医学部, 助手 (00253055)
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Keywords | 胃癌 / 胃腸上皮化生 / 遺伝子欠失 |
Research Abstract |
ゲノムライブラリーの作成及びそのスクリーニングによる目標遺伝子の単離を目標として、研究を行なった。大腸癌細胞株WiDrからの、ゲノムライブラリーの作成に着手するのと平行して、JCRBから供与を受けたヒト末梢リンパ球ゲノムライブラリーを対象として、スクリーニングを開始した。欠失の認められる2.2kbpシグナルは、胃癌DNAをHinfI消化し、criptoのcDNAをプローブとしたサザン法にて検出されることから、ヒト末梢リンパ球ゲノムライブラリーを対象とした、スクリーニングにはcriptoのcDNAをプローブとし用いた。この結果、14の陽性クローンが得られた。これらは、制限酵素による切断パターンから6種類に分けられた。これらから、インサートを抽出し、これらをプローブとしてサザン法を施行したが、いずれのクローンからも、目的とする2.2kbpのシグナルは得られなかった。この原因としては、ライブラリーが上皮由来のものでないことや、スクリーニングの条件設定に問題があったことが考えられる。現在、WiDrからのライブラリー作成を行なっている。 前年度の結果にて、2〜3kbpDNA断片からcriptoによるスクリーニングにより陽性クローンを得たが、これは部分シークエンシングにより、チトクロームp4502D6との間に相同性が認められた。同遺伝子の変化をサザン法にて検索したところ、小数例において腫瘍部での変化が認められた。しかし、その頻度は目的とする遺伝子の欠失頻度に比較し低率であった。現在、マイクロサテライト法にて、さらに、検討を行なっている。
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[Publications] K.Yoshida: "Coamplification of cyclin D,hst-1 and int-2 genes is a good biological marker of high malignancy for human esophageal carcinomas" Oncology Reports. 1. 493-496 (1994)
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[Publications] H.Kuniyasu: "Expression of cripto in human gastric carcinomas:an association with tumor stage and prognosis" J.Exp.Clin.Cancer Res.13. 151-157 (1994)
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[Publications] H.Kuniyasu: "Frequent loss of heterozygosity of the long arm of chromosome 7 is closely associated with progression of human gastric carcinomas" Int.J.Cancer. 59. 597-600 (1994)
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[Publications] T.Saeki: "Immunohistochemical detection of cripto-1,amphiregulin and transforming growth factor alpha in human gastric carcinomas and intestinal metaplasia" Int.J.Oncol.5. 215-223 (1994)
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[Publications] H.Yokozaki: "Expression of CD 44 abnormal transcripts in human gastric carcinomas" Cancer Lett.83. 229-234 (1994)
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[Publications] E.Tahara: "Gene alteration in intestinal metaplasia and gastric cancer" Europ.J.Gastroenterol.Hepatol.6(suppl 1). S97-S101 (1994)
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[Publications] E.Tahara: "Gann Monograph on Cancer Research 42" Japan Scientific Societies Press, 178 (1994)