1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトWilms腫瘍細胞株を用いたWilms腫瘍抑制遺伝子(WT-1)の機能解析

Research Project

Project/Area Number	06770165
Research Institution	Yokohama City University
Principal Investigator	長嶋洋治横浜市立大学, 医学部, 講師 (10217995)
Keywords	Wilms腫瘍 / WT-1遺伝子 / ヌードマウス移植株 / 遺伝子移入
Research Abstract	(目的)本研究では、当初、1.無虹彩症患児に発生したWilms腫瘍より樹立したヌードマウス移植腫瘍株KCMC-WT-1よりin vitro培養細胞株を樹立し、性格付けを行う、2.1で樹立された培養細胞株に、Wilms腫瘍抑制遺伝子(候補)WT-1 cDNAを組み込んだ発現プラスミドを移入し、細胞の性格の変化を検討し、WT-1遺伝子の機能解析を行う、ことを目的とした。 (方法および結果)1.KCMC-WT-1の継代時毎に(現在継代21代)、培養細胞株を樹立を試みた。しかし、組織片植え込み法、酵素消化法のいずれにおいても、マウス線維芽細胞の増殖により腫瘍細胞の安定した増殖は得られなかった。現在、培養条件を検討中であるが、無血清培地、低カルシウム培地、浸透圧を変化させた培地などを用いた培養を試みている。2.KCMC-WT-1より細胞株の樹立が困難であったため、我々が樹立したラットWilms腫瘍細胞株ENU-T-1(Nagashima et al.,1989; Sumino et al.,1992, Nagashima et al.,1992)をrecipient細胞として用いることを検討した。本細胞株はノザン法にてラットWT-1遺伝子転写産物を欠いており、本実験に適している。 3.WT-1遺伝子の発現プラスミドとしてpCAGGS-neo-WT1(秋山徹博士より供与)を用いENU-T-1に、リポフェクチン法による遺伝子移入を行った。現在、得られたクローンの性格(増殖性変化、ヌードマウス移植性の変化など)を検討している。(付記)KCMC-WT-1は継代中に、組織学的に、器官様成分が失われ、腎芽細胞成分によって構成されるようになった。このことから、細胞株の樹立がより容易になると期待される。

Research Products
(13 results)

All Other

All Publications (13 results)

[Publications] Nagashima et al.: "Establishment of three rat soft tissue tumor cell lines with different degrees of myogenic differentiation." Pathol.Res.Pract.190. 1071-1076 (1994)
[Publications] Nagashima et al.: "Metanephric adenoma of the kidney." Int.J.Surg.Pathol.2. 478- (1994)
[Publications] Nagashima et al.: "Establishment and characterization of a malignant melanoma cell line (YP-MEL) derived from a NCMsis patient." Pathol.Res.Pract.190. 178-185 (1994)
[Publications] Fukushima,Nagashima et al.: "Chromophobe renal cell carcinoma." Pathol.Int.44. 401-406 (1994)
[Publications] Shuin,Nagashima et al.: "Frequent somatic mutation and loss of heterozygosity of VHL tumor suppressor gene in human renal cell carcinoma." Cancer Res.54. 2852-2855 (1994)
[Publications] Koshikawa,Nagashima et al.: "Identification of single-chain and two-chain forms of trypsinogen 1 produced by human gastric adenocarcinoma cell line." Biochem.J.333. 187-191 (1994)
[Publications] Miyagi,Nagashima et al.: "Studies for genes expressed in neuroblastomas detected by mass screening." Proc.3rd Int.Symp.Neuroblastoma Screening. 148-151 (1994)
[Publications] Macida,Nagashima et al.: "Establishment and characterization of rat osteosarcoma cell lines induced by radioactive phosphorus." Pathol.Res.Pract.(in press).
[Publications] Miyagi,Nagashima et al.: "Marked induction of gelatinases,especially type B,in host fibroblasts by human ovarian cancer cells nude mice." Clin.Exp.Metastasis. 13(in press). (1995)
[Publications] Gorai,Nagashima et al.: "Establishment and characterization of two human ovarian clear cell adenocarcinoma lines from metastatic lesions." Gynacol.Oncol.(in press).
[Publications] 越川直彦,長嶋洋司,宮崎香: "胃癌細胞が分泌するマトリックス・メタロプロテアーゼ" 消化器癌. 4. 423-427 (1994)
[Publications] 長嶋洋司他: "無虹彩症患児に発生したWilms腫瘍より樹立されたヌードマウス移植株の性状" 第53回日本癌学会総会記事. 1274- (1994)
[Publications] 長嶋洋治(他): "腫瘍鑑別アトラス「腎臓」・「後腎性腺腫」" 文光堂(東京), 189 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトWilms腫瘍細胞株を用いたWilms腫瘍抑制遺伝子(WT-1)の機能解析

Principal Investigator

長嶋 洋治 横浜市立大学, 医学部, 講師 (10217995)

Research Products

[Publications] Nagashima et al.: "Establishment of three rat soft tissue tumor cell lines with different degrees of myogenic differentiation." Pathol.Res.Pract.190. 1071-1076 (1994)

[Publications] Nagashima et al.: "Metanephric adenoma of the kidney." Int.J.Surg.Pathol.2. 478- (1994)

[Publications] Nagashima et al.: "Establishment and characterization of a malignant melanoma cell line (YP-MEL) derived from a NCMsis patient." Pathol.Res.Pract.190. 178-185 (1994)

[Publications] Fukushima,Nagashima et al.: "Chromophobe renal cell carcinoma." Pathol.Int.44. 401-406 (1994)

[Publications] Shuin,Nagashima et al.: "Frequent somatic mutation and loss of heterozygosity of VHL tumor suppressor gene in human renal cell carcinoma." Cancer Res.54. 2852-2855 (1994)

[Publications] Koshikawa,Nagashima et al.: "Identification of single-chain and two-chain forms of trypsinogen 1 produced by human gastric adenocarcinoma cell line." Biochem.J.333. 187-191 (1994)

[Publications] Miyagi,Nagashima et al.: "Studies for genes expressed in neuroblastomas detected by mass screening." Proc.3rd Int.Symp.Neuroblastoma Screening. 148-151 (1994)

[Publications] Macida,Nagashima et al.: "Establishment and characterization of rat osteosarcoma cell lines induced by radioactive phosphorus." Pathol.Res.Pract.(in press).

[Publications] Miyagi,Nagashima et al.: "Marked induction of gelatinases,especially type B,in host fibroblasts by human ovarian cancer cells nude mice." Clin.Exp.Metastasis. 13(in press). (1995)

[Publications] Gorai,Nagashima et al.: "Establishment and characterization of two human ovarian clear cell adenocarcinoma lines from metastatic lesions." Gynacol.Oncol.(in press).

[Publications] 越川直彦,長嶋洋司,宮崎香: "胃癌細胞が分泌するマトリックス・メタロプロテアーゼ" 消化器癌. 4. 423-427 (1994)

[Publications] 長嶋洋司 他: "無虹彩症患児に発生したWilms腫瘍より樹立されたヌードマウス移植株の性状" 第53回 日本癌学会総会記事. 1274- (1994)

[Publications] 長嶋洋治(他): "腫瘍鑑別アトラス「腎臓」・「後腎性 腺腫」" 文光堂(東京), 189 (1994)

長嶋洋治横浜市立大学, 医学部, 講師 (10217995)

[Publications] 長嶋洋司他: "無虹彩症患児に発生したWilms腫瘍より樹立されたヌードマウス移植株の性状" 第53回日本癌学会総会記事. 1274- (1994)

[Publications] 長嶋洋治(他): "腫瘍鑑別アトラス「腎臓」・「後腎性腺腫」" 文光堂(東京), 189 (1994)