1994 Fiscal Year Annual Research Report

c-Junによるインスリン遺伝子発現制御のメカニズム

Research Project

Project/Area Number	06770797
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	稲垣暢也千葉大学, 医学部, 助手 (30241954)
Keywords	インスリン遺伝子 / cAMP反応性塩基配列 / 転写因子 / c-Jun
Research Abstract	申請者らは、すでに、ヒトインスリン遺伝子のプロモーター領域に4ヵ所のcAMP反応性塩基配列(CRE)が存在し、c-JunがこれらのCREを介してインスリン遺伝子の発現やcAMP反応性を抑制する可能性について報告してきた。平成6年度は、 ♭1.まずc-Junの作用点について解析した。方法としてc-JunのDNA結合ドメインを欠失させた発現プラスミド(Δc-Jun)あるいはwild type c-Junの発現プラスミド(wt c-Jun)をヒトインスリンのプロモーターを連結させたCATプラスミドと共にハムスターのβ細胞株(HIT-T15)にトランスフェクションし、cAMPのインスリン遺伝子の転写活性に及ぼす効果について検討した。対照としてwt c-JunあるいはΔc-Junのかわりにβグロビンの発現プラスミドを用いた。その結果、wt c-Junをトランスフェクションした場合には、対照と比較してインスリン遺伝子の転写活性あるいはcAMP反応性は著しく抑制されたが、Δc-Junをトランスフェクションした場合、その抑制は対照と同レベルまで完全に解除された。従って、c-Junの抑制効果には、DNA結合領域が重要であることが明らかとなった。 ♭2.次にc-Junと同じファミリーに属し、ロイジンジッパー構造を有するc-Fos,Jun B,Jun Dについても、ヒトインスリン遺伝子の転写活性やcAMP反応性に及ぼす影響について検討した。その結果c-Fosはc-Junと同様に強い抑制効果を有したが、Jun B,Jun Dの抑制作用はc-Junやc-Fosに比して弱かった。これらの転写因子の発現量に及ぼすグルコース濃度の効果をHIT細胞を用いてノザン法で解析したところ、c-Junは培養液中のグルコースを除くことにより、著しい発現の増大を認めた。Jun Bもグルコース除去によりわずかに発現の増大を認めたが、c-Fos,Jun Dの発現量はグルコース濃度により変化を受けなかった。従って、低グルコース濃度に伴うインスリン遺伝子の転写抑制には、c-Junが最も重要な因子であることが予想された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning and functional characterization of a third pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide receptor subtype expressed in insulin-secreting cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 2679-2683 (1994)
[Publications] Mizuta,M.et al.: "Synaptotagmin III is a novel isoform of rat synaptotagmin expressed in endocrine and neuronal cells." J.Biol.Chem.269. 11675-11678 (1994)
[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning of a mouse rabphilin-3A expressed in hormone-secreting cells." J.Biochem.116. 239-242 (1994)
[Publications] Yasuda,K.et al.: "Hamster gastric inhibitory polypeptide receptor expressed in pancreatic islets and clonal insulin-secreting cells:its structure and functional properties." Biochem.Biophys.Res.Commun.205. 1556-1562 (1994)
[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning and functional characterization of a novel ATP-sensitive potassium channel ubiquitously expressed in rat tissues,including pancreaticislets, pituitary,skeletal muscle,and heart." J.Biol.Chem.(in press).
[Publications] 稲垣暢也: "cAMPによるヒトインスリン遺伝子の発現調節" 日本臨床. 52. 2528-2534 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

c-Junによるインスリン遺伝子発現制御のメカニズム

Principal Investigator

稲垣 暢也 千葉大学, 医学部, 助手 (30241954)

Research Products

[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning and functional characterization of a third pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide receptor subtype expressed in insulin-secreting cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 2679-2683 (1994)

[Publications] Mizuta,M.et al.: "Synaptotagmin III is a novel isoform of rat synaptotagmin expressed in endocrine and neuronal cells." J.Biol.Chem.269. 11675-11678 (1994)

[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning of a mouse rabphilin-3A expressed in hormone-secreting cells." J.Biochem.116. 239-242 (1994)

[Publications] Yasuda,K.et al.: "Hamster gastric inhibitory polypeptide receptor expressed in pancreatic islets and clonal insulin-secreting cells:its structure and functional properties." Biochem.Biophys.Res.Commun.205. 1556-1562 (1994)

[Publications] Inagaki,N.et al.: "Cloning and functional characterization of a novel ATP-sensitive potassium channel ubiquitously expressed in rat tissues,including pancreaticislets, pituitary,skeletal muscle,and heart." J.Biol.Chem.(in press).

[Publications] 稲垣暢也: "cAMPによるヒトインスリン遺伝子の発現調節" 日本臨床. 52. 2528-2534 (1994)

稲垣暢也千葉大学, 医学部, 助手 (30241954)